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去势抵抗性前列腺癌(CRPC)是前列腺癌经前期雄激素剥夺治疗后对雄激素非依赖型的癌症,后期发生转移的概率极高,迫切需要寻找新的创新性治疗策略。嵌合抗原受体T细胞免疫疗法(CAR-T)在治疗血液瘤中显示出显著的功效,为肿瘤治疗提供了新的可能性。但在前列腺癌这类淋巴细胞浸润程度低的冷肿瘤中效果却不理想。不同的细胞因子或趋化因子已显示出可增强T细胞的增殖、存活和肿瘤浸润等不同的功能。我们对CRPC患者来源的CD4~+和CD8~+T细胞进行了改造,使其在表达靶向PSMA的CAR结构的同时表达IL-7和CCL19,提高CAR-T细胞的存活和浸润能力,进而将肿瘤从“冷”变“热”,以克服目前CAR-T在CRPC治疗中存在的浸润低、增殖能力差等问题。我们设计了表达嵌合抗原受体的慢病毒载体,该载体使用2A肽序列串联三个组分,实现IL-7和CCL19与PSMA特异的CAR序列的共同表达。制备出了滴度较高的慢病毒,并通过这些慢病毒感染从病人外周血分离的CRPC-T细胞获得了阳性率在60%以上的7?19-PSMA-CAR-T细胞。研究发现7?19-PSMA-CAR-T细胞在体外细胞毒性实验中在表现出与PSMA-CAR-T细胞相当的肿瘤杀伤能力和细胞活化水平。此外,在体外实验中发现与PSMA-CAR-T细胞相比,7?19-PSMA-CAR-T细胞有更强的增殖存活能力,更高比例的初始T细胞,更低的耗竭分子的表达。同时还能够招募T细胞、DC及CAR-T细胞。我们使用免疫缺陷型(NSG)小鼠肿瘤模型评估了7?19-PSMA-CAR-T细胞的抗肿瘤功能。我们发现两种CAR-T细胞都具有靶向的特异性,而且7?19-PSMA-CAR-T细胞在第14天就清除了肿瘤,具有更强的治疗肿瘤的能力。在治疗中不引起小鼠体重的下降。体内相关指标的检测发现7?19-PSMA-CAR-T细胞治疗组小鼠外周血中的CAR-T细胞能分泌更多GzmB和IFN-γ。肿瘤部位中有更多的T细胞聚集。我们认为在T细胞中表达PSMA特异性CAR的同时共表达IL-7和CCL19有利于增殖、浸润和功效的增强,可能是治疗CRPC的有效的策略。