牛外周血淋巴细胞对输卵管上皮细胞和卵泡颗粒细胞凋亡及生长的影响

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jackzhao1
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本试验目的是研究外周血淋巴细胞对输卵管上皮细胞和卵泡颗粒细胞周期和凋亡的影响。将分离出的外周血淋巴细胞分别与等量纯化后的输卵管上皮细胞、卵泡颗粒细胞按照10:1、5:1、3:1、1:1不同比率接种于24孔培养板共培养4天,以单独培养的输卵管上皮细胞及卵泡颗粒细胞作为对照组。用倒置显微镜观察输卵管上皮细胞基本生长状况;台盼蓝染色了解细胞成活率;细胞以碘化丙啶染色法处理,用流式细胞仪检测输卵管上皮细胞和卵泡颗粒细胞周期及凋亡情况。结果表明:外周血淋巴细胞与输卵管上皮细胞共培养时,对上皮细胞凋亡有促进作用,各个试验组与对照组比较差异极显著(P<0.01)。其中5:1组凋亡率最高,10:1组最低,3:1组与1:1组差异不显著(P>0.05),其它每两组比较差异显著(P<0.05)。表明外周血淋巴细胞与上皮细胞的比率决定其凋亡率;外周血淋巴细胞与颗粒细胞共培养时,抑制卵泡颗粒细胞的凋亡,其中10:1组和3:1组凋亡率明显低于对照组,两组表现出显著性差异(P<0.05),其中10:1组与对照组差异极显著(P<0.01),而5:1组、1:1组和对照组相互无显著性差异(P>0.05)。表明外周血淋巴细胞与颗粒细胞的比率决定其凋亡率;为研究在共培养体系中加入PHA对输卵管上皮细胞及卵泡颗粒细胞凋亡的影响,先进行了PHA对输卵管上皮细胞和卵泡颗粒细胞生长和凋亡影响的研究。结果表明:培养基中加入PHA对卵泡颗粒细胞生长无显著影响(P>0.05),对其凋亡差异极显著(P<0.01);但试验组S期比例高于对照组,表现出显著性差异(P<0.05),推断出PHA对上皮细胞增殖有促进作用。介于外周血淋巴细胞与输卵管上皮不同比率共培养的结果,用外周血淋巴细胞分别与第四代、第八代输卵管上皮细胞以5:1的比率进行共培养4天,并在培养基中加入PHA,细胞以Hoechst 33342/PI染色法处理,用流式细胞仪检测上皮细胞凋亡。用来说明共培养体系中加入PHA对输卵管上皮细胞凋亡的影响。结果表明:不同代数的上皮细胞试验组凋亡率接近于对照组。推测加入PHA共培养时抑制上皮细胞凋亡。
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