沉默CYP19A1基因对肝癌细胞HePG2生物学行为的影响

来源 :广西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jzymw
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:本研究旨在检测CYP19A1在人肝癌细胞Hep G2中的表达水平,探索沉默CYP19A1对人肝癌细胞Hep G2体外生物学功能以及对人肝癌细胞Hep G2体内成瘤能力的影响,为寻找肝癌有效生物标志物提供前期依据。方法:利用UALCAN(http://ualcan.path.uab.edu/index.html)分析癌症基因图谱(TCGA)数据库中CYP19A1在肝癌组织中与正常肝组织中的表达水平情况;运用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术和蛋白免疫印迹(Western-blot)技术检测CYP19A1在人肝癌细胞Hep G2和人正常肝细胞LO-2中的表达水平;通过慢病毒载体转染技术下调CYP19A1在Hep G2细胞中的表达,并应用q RT-PCR技术和Western-blot技术验证病毒转染效率,获取稳转细胞株。利用CCK8实验、平板克隆形成实验、流式周期实验、流式凋亡实验、划痕实验、Transwell实验分析评价沉默CYP19A1对肝癌Hep G2体外生物学功能的影响。应用裸鼠成瘤实验分析评价沉默CYP19A1对肝癌Hep G2成瘤能力的影响。结果:1、在线数据工具分析TCGA数据库结果显示:CYP19A1基因在50例正常肝组织中不表达(M=0.000,Q25=0.000,Q75=0.007),而在371例肝癌组织中呈现较高表达(M=0.017,Q25=0.000,Q75=0.042),差异具有统计学意义(P0.05),与si-NC组和Hep G2组相比,si CYP19A1组细胞吸光度较低,至24h起开始出现显著差异(P0.05)。相比于si-NC组和Hep G2组,si CYP19A1组G0/G1期细胞比例增加(71.22±0.94 vs 64.86±1.83 vs 64.12±1.76,P0.05)。相比于si-NC组和Hep G2组,si CYP19A1组细胞凋亡率显著增加,差异具有统计学意义(10.35±1.23 vs3.39±0.47 vs 3.53±0.90,P0.05)。si CYP19A1组(119.944±51.269)裸鼠成瘤的体积显著小于si-NC组(567.043±59.942)和Hep G2组(591.494±149.981),差异有统计学意义(P<0.05),提示si CYP19A1组的细胞体内成瘤能力减弱。结论:1、CYP19A1在人肝癌细胞株Hep G2中高表达。2、沉默CYP19A1基因表达可抑制Hep G2细胞体外增殖、迁移、侵袭能力,使肝癌Hep G2细胞周期停滞于G0/G1,影响细胞的增殖,并且能够促进肝癌Hep G2细胞凋亡。3、沉默CYP19A1基因能有效抑制肝癌Hep G2体内成瘤能力。
其他文献
目的:分析不同翼状胬肉形态(长度、宽度、面积)下与术前角膜像差的相关关系,以及观察不同形态的翼状胬肉手术后角膜总高阶像差与术前角膜高阶像差是否存在相关性,为寻求更利于术后视觉质量恢复的手术时间作参考。方法:本研究采用前瞻性研究观察2019年7月-2020年1月间于广西医科大学第一附属医院眼科住院的42例共45眼行翼状胬肉切除手术的患者以及术后1月复诊患者21例24只眼,研究对象为鼻侧翼状胬肉患者,
背景:粒细胞集落刺激因子(Granulocyte colony-stimulating factor G-CSF)动员的外周血单核细胞(Peripheral blood mononuclear cells PBMCs)富含造血干细胞及间充质干细胞(Mesenchymal stem cells MSCs),多项研究均证实MSCs可改善POI的卵巢功能,而富血小板血浆(Platelet-rich pl
目的:基于甲亢的病情选择不同的初始抗甲状腺药物(anti-thyroid drugs,ATD)剂量治疗,分层观察患者的体重、体表面积和甲状腺大小对药物疗效的影响。方法:研究对象为2017年10月至2019年12月至广西医科大学第一附属医院内分泌科门诊就诊的甲状腺功能亢进症患者,依据纳入及排除标准共纳入观察的患者83例,所有患者全部给予口服甲巯咪唑(methimazole,MMI)治疗,记录患者就诊
目的和意义:类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是一种病因未明的慢性、系统性的自身免疫性疾病,其主要的病理改变主要为全身对称性多关节的慢性、持续性的滑膜炎症,滑膜组织增生和关节软骨的破坏,晚期可因关节僵直或畸形,导致关节功能的丧失,长病程者还可伴有循环、呼吸、泌尿系统的受累。由于RA病程长,反复发作,迁延不愈,疾病发展到后期有较高的致残率,给患者和社会都带来了沉重的负担。
目的:1.了解青少年病理性网络游戏使用的现况及其影响因素。2.了解青少年童年期创伤、抑郁程度、焦虑程度、睡眠障碍的现况。3.探讨童年期创伤、抑郁、焦虑、睡眠障碍、核心自我评价等对病理性网络游戏使用的影响。方法:1.采用横断面调查法,选取广西崇左市2所初中、1所高中的在校学生作为研究对象,符合纳入标准的青少年总计1766名。2.采用自编一般人口学资料问卷、病理性网络游戏量表简版中文版(POGQ-SF
目的:分析抗NMDAR脑炎患者中,血清自身免疫性抗体阳性与阴性的临床特征差异。方法:回顾性收集38例2018年6月至2019年11月在广西医科大学第一、第二附属医院神经内科及儿科门诊或住院、确诊为抗NMDAR脑炎患者,收集患者的一般资料、临床症状及体征、血清及脑脊液生化资料、影像学检查等。按照血清自身免疫性抗体是否阳性划分为阳性组与阴性组,比较两组一般资料、临床症状及体征、血清及脑脊液生化资料、影
目的:单体核型(monosomal karyotype,MK)对急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)的不良预后影响存在争议,故应用Meta分析方法系统评价单体核型是否为急性髓系白血病不良预后的独立危险因素,进一步探讨单体核型急性髓系白血病更精准有效的分层治疗方案。方法:根据Meta分析的PICOS原则制定检索策略、文献纳入及排除标准,随后通过计算机互联网在Pubm
目的:探寻本机构结直肠手术后近期(30天内)非计划再次手术的危险因素以及常见再手术原因,为结直肠外科的医疗安全质量管理研究提供参考。方法:回顾性研究2015年1月至2019年10月期间,在广西医科大学第一附属医院结直肠肛门外科,行结直肠手术的患者,并找出术后30天内接受非计划再次手术患者,收集临床病例资料。对非计划再手术的预测危险因素进行单因素及多因素分析,并对非计划再次手术患者再次手术原因进行单
目的:研究激活黑皮质素受体-1(Melanocortin receptor-1,MC1R)对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导小胶质细胞BV2炎症的抑制作用及其相关机制,同时进一步探讨其神经保护作用。方法:(1)以LPS(100ng/ml)诱导小胶质细胞BV2炎症建立帕金森病(Parkinson’disease,PD)的炎症模型。细胞分组:(1)正常对照组;(2)模型组:L
目的:探讨纤维支气管镜下金属支架、房间隔缺损封堵器置入治疗支气管胸膜瘘(bronchopleural fistula,BPF)的有效性,安全性及可行性。方法:对广西医科大学第二附属医院2015年1月1日至2018年12月31日收治并确诊为支气管胸膜瘘的3例患者进行回顾性分析,分析支气管胸膜瘘的相关临床表现及胸部CT(computed tomography,计算机断层扫描)表现、纤支镜下表现、内镜下