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目的:通过在体外原代培养大鼠支气管成纤维细胞,获得性状稳定、状态良好的大鼠支气管成纤维细胞。初步探讨TGF-β1对大鼠支气管成纤维细胞分泌IL-6、IL-8及CCL20可能的影响。方法:1.体外分离培养正常大鼠支气管成纤维细胞,根据细胞形态、组织来源以及使用免疫荧光鉴定证实为大鼠支气管成纤维细胞,选择第三代细胞进行实验。2.分别用 Ong/ml(对照组)、5ng/ml、10ng/ml、20ng/ml 的 TGF-β1 浓度干预大鼠支气管成纤维细胞2h、12h、24h、48h后,收集各组细胞培养物上清,用ELISA方法检测各实验样本支气管成纤维细胞上清中IL-6、IL-8及CCL20的分泌量。结果:1.体外成功培养大鼠支气管成纤维细胞,细胞为长梭形、三角形或多边形细胞,由细胞形态、组织来源以及免疫荧光鉴定可鉴定该细胞的确为大鼠支气管成纤维细胞。传代后细胞生长旺盛,状态良好,性状稳定。为理想的支气管成纤维细胞实验模型。2.通过ELISA方法检测,在Ong/ml TGF-β1条件下大鼠支气管成纤维细胞在 2h、12h、24h、48h IL-6 的表达量分别为 26.412±0.471ng/l、26.912±0.274ng/l、28.046±0.565ng/l、28.862±0.695ng/l,CCL20 的表达量分别为 10.163±0.261ng/l、10.396±0.429ng/l、11.197±0.381ng/l、11.771±0.168ng/l,IL-8 的表达量分别为772.633±1.989ng/l、775.826±2.306ng/l、781.454±2.589ng/l、789.492±1.840ng/l。3.与Ong/ml对照组相比,除TGF-β1 5ng/ml组在2h时间段内,大鼠支气管成纤维细胞上清中IL-6的含量增加(P<0.05),其余各组在各时间段大鼠支气管成纤维细胞上清中IL-6的含量均低于对照组(P<0.05)。4.与Ong/ml对照组相比,除TGF-β1 5ng/ml组在2h时间段内,大鼠支气管成纤维细胞上清中CCL20的含量无显著差异(P>0.05),其余各组在各时间段大鼠支气管成纤维细胞上清中CCL20的含量均低于对照组(P<0.05)。5.与0ng/ml对照组相比,除TGF-β1 5ng/ml组在24h时间段内,大鼠支气管成纤维细胞上清中IL-8的含量增加(P<0.05),其余各组在各时间段大鼠支气管成纤维细胞上清中IL-8的含量均低于对照组(P<0.05)。结论:1.本实验成功获得大鼠支气管成纤维细胞的原代培养。2.支气管成纤维细胞是IL-6、IL-8、CCL20的来源细胞。3.TGF-β1对于IL-6及IL-8的释放具有诱导也有抑制作用,但总体上以抑制作用为主,具有明显的时间和浓度依赖性。TGF-β1以浓度和时间依赖的方式抑制大鼠支气管成纤维细胞CCL20的表达。