白灵菇是一种药食同源的稀有食用真菌,人工栽培的成功无疑为开发这一生物资源提供了良好的应用前景,随着我国白灵菇产业化的不断发展,每年都有大量的白灵菇根部下脚料废弃。白灵菇根部含有多糖等生物活性物质,是一种潜在的宝贵资源,因此,提高白灵菇的附加值成为研究热点。为充分提高白灵菇根部下脚料的多糖提取率,本文对其提取条件进行了优化,之后进行分离纯化,并进行理化性质测定及结构鉴定,最后探讨其对肝癌HepG-2细胞生长的影响。在单因素实验的基础上,选择了水料比、提取温度和提取时间作为实验单因素,根据Box-Benhnken(BBD)中心组合实验设计原理,进行响应面和各因素交互作用综合实验分析,以白灵菇根部多糖的提取率作为响应值,在分析三个所选单因素的显著性和交互作用基础上,得出白灵菇根部多糖提取的最佳工艺条件:水料比39.22:1、提取温度90.3℃、提取时间3.06h,该条件下白灵菇根部多糖提取率预测值是1.98%,根据实验条件,将水料比调整为40:1,提取温度调整为90℃,提取时间调整为3h测得多糖提取率为2.01%,与预测值基本一致。采用离子层析、凝胶过滤等纯化方法,从白灵菇根部中纯化出了5个多糖组分,通过体外细胞增殖实验,筛选出对HepG-2细胞增殖抑制率较高的组分PN75-2,经高效液相色谱分析表明,PN75-2为分子量均一的多糖,分子量为2.90×105Da;理化性质分析得知,PN75-2具有吡喃型的α-糖苷键结构,糖含量为92.5%,蛋白质含量为3.6%,糖醛酸含量为0.6%,无硫酸基的存在,具有较多的侧链和分枝,在扫描电镜下呈絮状排列。并对其旋光度、热特性、流变学等理化性质进行了探究。以肝癌HepG-2细胞为模型,通过MTT法研究了白灵菇根部下脚料多糖纯化组分PN75-2对其的抑制作用,PN75-2浓度为200μg/mL时对肝癌HepG-2细胞的抑制作用最强,抑制率达到38.3%。对HepG-2细胞形态进行扫描电镜观察实验以及AO/EB染色实验,实验结果显示,白灵菇根部多糖PN75-2能够诱导肝癌HepG-2细胞凋亡。