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药物分析领域中复杂样品的快速灵敏检测往往存在一定的困难。近年来,电化学分析领域中的电化学传感器技术在应用于复杂样品的快速灵敏检测中表现出显著的优势,尤其是在疾病标志物和中药活性组分分析检测方面。类风湿关节炎(RA)可以造成关节永久性损伤,具有一定的危害性,早期诊断对于RA患者的治疗至关重要。另外,葛根素作为中药葛根中的主要活性成分,是中药葛根质量评价的主要指标。为了实现RA疾病标志物和葛根素的快速灵敏分析,本文基于RA疾病标志物的蛋白质特性和葛根素的电化学活性,利用电化学、生物化学以及物理化学的原理,采用新型的电极修饰材料,最优的反应条件和检测体系,构建了针对RA标志物环瓜氨酸肽抗体(anti-CCP)、结缔组织生长因子(CTGF)和葛根素的快速灵敏检测的电化学传感器。所构建的方法为临床RA的辅助诊断提供了新的分析手段,也为中药葛根质量的评价及中药电活性成分葛根素的灵敏分析提供了一种便捷的方法。具体内容如下:1无标记电化学免疫传感器用于环瓜氨酸肽抗体的灵敏检测环瓜氨酸肽抗体(anti-CCP)是类风湿关节炎(RA)的特异性生物标志物之一,其灵敏检测对RA的早期诊断至关重要。利用氮掺杂石墨烯优良的电化学特性以及金纳米粒子较好的生物相容性,以及纳米金可以与蛋白质通过静电吸附作用结合的原理,构建了用于anti-CCP灵敏检测的无标记电化学免疫传感器。采用交流阻抗法和方波伏安法对免疫传感器的构建过程进行了考察。在优化的传感器构建条件和检测条件下,用方波伏安法来考察环瓜氨酸肽和anti-CCP的结合过程。由于抗原抗体免疫复合物的形成可以阻碍介质和电极之间的电子转移,使响应信号随着抗体浓度增加而降低。该无标记免疫传感器不但构建过程简单,还表现出较好的特异性、选择性、稳定性,其线性范围为0.1252000 pg mL-1,检测限为0.0125 pg mL-1。此外,还对添加了anti-CCP的人血清样本进行分析。研究结果显示,基于金纳米粒子和N-G纳米复合材料的用于anti-CCP灵敏检测的便携式免疫传感器有望用于辅助诊断RA。2基于碱活化氮掺杂石墨烯的电化学免疫传感器用于结缔组织生长因子的测定结缔组织生长因子(CTGF)是一种与多个组织器官纤维化密切相关的富含半胱氨酸的促有丝分裂肽,它可以作为诊断类风湿关节炎(RA)的潜在生物标志物。利用蛋白质上的氨基可以与碳材料表面的羧基形成酰胺键而牢固结合的原理,将具有三维孔状结构的碱活化氮掺杂石墨烯(aN-G)作为电极基底材料,成功构建了用于CTGF灵敏检测的电化学免疫传感器。该无标记免疫传感器的工作原理是基于CTGF与抗体的结合在电极表面形成了阻碍电子传递的绝缘层,从而导致电流响应信号减弱。采用扫描电子显微镜,拉曼光谱,红外光谱以及电化学循环伏安法和交流阻抗法对修饰电极的表面形貌和性能进行了表征;用差分脉冲伏安法构建了CTGF检测的标准曲线,线性范围为0.0625125 pg mL-1,1252000 pg mL-1;检测限为0.0625 pg mL-1。此外,用制备的传感器对加标的人血清样品进行分析,表现出良好的选择性和稳定性;对于临床上确诊的RA患者的血清样本,也能实现准确检测。该传感器为CTGF的检测提供了新的方法,为复杂样本中CTGF的快速检测提供了分析手段,有望成为临床上辅助诊断RA的新手段。3基于超微活性炭的电化学传感器用于葛根素的分析活性炭经过剧烈的超声裂解后,在保持其原有高导电性的基础上,又赋予其较大的比表面积,为高灵敏电化学传感器的构建提供了先决条件。利用成功制备的超微活性炭构建了用于中药葛根中葛根素灵敏分析的电化学传感器。采用循环伏安法考察了葛根素在传感器上的电化学行为,并对传感器的制备条件和葛根素检测时的条件进行了优化。在优化的条件下,采用差分脉冲伏安法对葛根素进行分析,结果显示在2.4×10-77 mol L-11.54×10-5 mol L-1浓度范围内具有良好的线性关系,且最低检测限为6.4×10-8 mol L-1。该传感器还表现出良好的重现性、稳定性和选择性。将该传感器用于实际样品分析时,具有优于已报道方法的性能。为中药葛根质量的评价及中药电活性成分葛根素的灵敏分析提供了一种便捷的方法。