【摘 要】
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莱克多巴胺(Ractopamine,RAC)是一种苯酚胺类β2肾上腺素受体激动剂,与“瘦肉精”盐酸克伦特罗一样具有促进营养再分配和生长的作用,因此被用作新型添加剂促进机体生长。由于莱克
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莱克多巴胺(Ractopamine,RAC)是一种苯酚胺类β2肾上腺素受体激动剂,与“瘦肉精”盐酸克伦特罗一样具有促进营养再分配和生长的作用,因此被用作新型添加剂促进机体生长。由于莱克多巴胺具有在动物体内蓄积残留的特性,食用莱克多巴胺添加剂饲养的动物会引起人们不同程度的中毒反应,具体表现为骨骼肌收缩增加,引起肌肉震颤。在我国已经禁止其生产和销售,但是非法使用的现象仍时有发生。目前,越来越多的分析方法被用于检测RAC残留,例如利用酶联免疫吸附测定法(ELISA)对RAC残留进行初步筛查,再通过质谱或者色谱进行确认。与色谱法、质谱法、生物传感器法等药物残留检测方法相比,免疫学分析方法不需要昂贵的仪器,具有操作简单和可以进行高通量检测的优点,在RAC残留检测中发展迅速并已得到广泛的应用。本研究通过三种不同的制备方法获得莱克多巴胺人工抗原。其中采用1,4-丁二醚法(Linker法)制备RAC人工抗原,并把此方法制备的RAC-OVA作为包被原;此外,利用混合酸酐法制备RAC人工抗原,最终获得偶联比分别为8:1,17:1,23:1的RAC-BSA人工抗原;另外,本研究首次利用N’N-羰基二咪唑法一步制备RAC人工抗原,采用不同的溶剂得到浓度和偶联比不同的RAC-BSA人工抗原。采用物理学的方法(紫外光谱扫描和SDS-PAGE凝胶电泳)以及免疫学的方法(间接ELISA)鉴定人工抗原是否偶联成功。本研究利用三种不同制备方案成功获得RAC人工抗原,并首次利用N’N-羰基二咪唑法成功制备了RAC人工抗原,并获得效价约为1:6400的抗血清。为制备高特异性抗RAC单克隆抗体奠定了基础。
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