腈水合酶固定化细胞的载体选择及复合固定化的研究

来源 :哈尔滨理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:langguoji
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
细胞固定化是在酶固定化基础上发展起来的一种高新技术和方法,它既可以提高生产效率和生产能力,延长生产周期,又易于细胞的分离和回收,已广泛应用于食品工业、轻化工业、制药工业、发酵工业和三废处理工业。本文利用细胞固定化技术选择合适载体固定腈水合酶产生菌株Rhodococcus sp.HUST-3催化水合丙烯腈生产丙烯酰胺,以解决现阶段生产中存在的酶活力损失严重、工艺过程复杂、后处理要求高等问题。首先,使用海藻酸钠、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、壳聚糖、琼脂等常用载体固定腈水合酶产生菌Rhodococcus sp.HUST-3,并对其固定化条件进行优化。研究发现,五种固定化细胞的相对酶活力分别为68.3%、62.3%、60.7%、82.9%、55.5%,同时发现琼脂不适合固定该菌株,而海藻酸钠、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、壳聚糖四种载体固定的细胞则各有优点:海藻酸钠固定化细胞制备简单球形规则,聚乙烯醇固定化细胞直径最大,聚丙烯酰胺固定化细胞强度最高,壳聚糖固定化细胞酶活最高,因此可以对四种载体进行复合使用。其次,对海藻酸钠载体制备的固定化细胞进行了正交实验和性质测定。研究发现,各因素对海藻酸钠固定化细胞的影响程度依次为:海藻酸钠浓度>海藻酸钠与菌液体积比>CaCl2浓度。此外,海藻酸钠固定化细胞的最佳固定化时间为6h,最适底物丙烯腈浓度为40g/L,最适水合催化pH值为7.0,最适水合催化温度为28℃。最后,以海藻酸钠作为最基本载体,与聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、壳聚糖分别复合固定腈水合酶产生菌株。研究发现,三种复合载体制备的固定化细胞的相对酶活力分别为93.1%、92.7%、97.6%,其中海藻酸钠-壳聚糖复合载体最适合固定腈水合酶产生菌Rhodococcus sp.HUST-3水解丙烯腈生产丙烯酰胺,其固定化方法为:将3.5%海藻酸钠溶液与1g/L腈水合酶菌悬液按体积比20:1混合均匀,用注射器平稳滴入4%CaCl2溶液中制成海藻酸钠固定化细胞,再将海藻酸钠固定化细胞置于1.6%壳聚糖醋酸溶液中覆膜30min即得海藻酸钠-壳聚糖固定化细胞,该法制备工艺操作简单,原料价格低廉易得,制得的固定化细胞机械强度高,酶活转化率为97.6%,比传统海藻酸钠固定化细胞提高29.3%,同时可以进行12批次连续水合反应。
其他文献
对我家乡几例多指症、腋臭病的调查吕恒厚(云南省建水县第二中学654311)多指和腋臭都是长期困扰患者思想、压抑患者精神,给社会造成阴影的常见遗传病。1调查目的人们从遗传方式上普遍把
小儿腹泻是一组以大便次数增多和大便性状改变为特点的临床综合征,是一种由多种病原、多因素引起的儿科常见病。现分析小儿腹泻的病因及推拿治疗的主要机制,浅析中医推拿治疗
<正>1 育苗1.1 茬口选择一般以豆类,小麦等夏田作物为前茬,忌连茬种植。1.2种子处理播种之前将柴胡种子用40-50℃的温水浸泡8-12小时,捞出浮在水面上的瘪子,并把沉在水底的饱
期刊
近代国家观的兴起对引导近代中国政治转型具有决定作用。围绕从君主专制如何向近代政治制度转型这一问题,清末以梁启超、严复为代表的立宪派与以孙中山为代表的革命派展开过
文章通过一节新授课"直线的点斜式方程"感受到:教师在教学过程中要整体把握教材,注重知识的前后联系,要理解学生的学习水平,合理设置问题,引导学生在合作探究、展示交流的过
随着桥梁工程服役时间增长,交通量增加,每年国省道都有部分危桥亟需拆除重建。危桥改造都是在即有道路上,为了保证道路畅通运营,这就需要尽量缩短工期,尽可能降低施工对交通
薇拉·凯瑟(Willa Cather 1873-1947)是20世纪美国著名的女性作家。凯瑟的作品极具地方色彩和强烈的时代感,她擅长描写美国历史上的拓荒时代,《我的安东尼亚》是其中最优秀的
由英国哲学家穆勒在培根研究的基础上创立的“穆勒五法”,是探求生物现象间因果联系的科学方法。本文结合中学生物教学实践,简要介绍“穆勒五法”及其在教学中的运用。1求同法(亦