慢性肾脏疾病是严重危害人类健康的常见疾病,各种病因导致的慢性、进展性肾脏疾病的最终归宿是肾纤维化,而肾纤维化的诊断目前依赖于有创的肾活检,因此寻找简便、无创的诊断标志物具有重要临床意义。外泌体是体内多种细胞分泌的脂质双层膜结构的微囊泡,内含蛋白质、mRNA、miRNA等物质。本研究以慢性肾脏病合并肾纤维化患者和健康对照组为研究对象,检测尿液外泌体含量,采用BCA法测量外泌体蛋白质含量和纳米颗粒跟踪分析技术测量颗粒总数,发现纤维化组较对照组外泌体含量明显增加,但轻度、中度、重度纤维化组之间没有差异。说明尿外泌体含量可以鉴别是否存在肾纤维化,但不能判断纤维化轻重程度。本研究为外泌体作为肾纤维化的诊断标志物提供了初步依据。肾小管间质纤维化是慢性肾脏病的共同病理改变,临床尚缺乏肾纤维化的无创诊断标志物。MicroRNA（miRNA）是一类内源性的非编码小RNA,调节细胞的增殖、分化、代谢和死亡等过程,其差异表达具有疾病诊断和预后判断作用。外泌体是miRNA的富集体且脂质双层膜结构能保护miRNA避免降解,从而更具研究和应用价值。本研究以慢性肾脏病合并肾纤维化患者和健康对照组为研究对象,提取尿液外泌体后,检测外泌体内与纤维化有关的miRNAs的表达,包括 miR-200a,miR-200b,miR-200c,miR-141,miR-429,miR-29a,miR-29b,miR-29c,miR-192,miR-21。结果 miR-200b 在纤维化组明显下降,且随着纤维化程度加重而下降更明显,并与肾小球滤过率和肾纤维化评分有相关性。为排除疾病本身对miRNAs表达的影响,检测同一种疾病IgA肾病或糖尿病肾病（DKD）轻度纤维化和中重度纤维化两组miRNAs表达,发现miR-200b仍随纤维化程度加重而下降。本研究通过筛查肾纤维化十个miRNAs的表达,得出结论外泌体miR-200b可作为肾纤维化的诊断标志物。尿液外泌体来源于泌尿系各个节段,外泌体特异蛋白能反映其来源部位,以及来源细胞的生理或病理状态。以特异蛋白作为标志对外泌体进行分选,检测不同节段的外泌体miRNA或许能提高作为诊断标志物的敏感性。本研究以慢性肾脏病合并肾纤维化患者以及健康对照者为研究对象,用差速超速离心法提取尿外泌体,并以CD13作为近端小管上皮细胞的标志物进行外泌体分选,检测分选前后外泌体miR-200b的表达。免疫组化显示CD13在肾脏近端小管上皮细胞表达,CD13和CD63双阳性的外泌体占18.6%,用CD13抗体包被的磁珠分选外泌体,分选纯度达到95.43%,蛋白印迹也证实了分选的可靠性。CD13阳性外泌体的miR-200b含量较低,而CD13阴性的外泌体miR-200b在纤维化组比健康对照组下降,且下降幅度超过未分选组。进一步分析原因发现miR-200b在人类肾脏并不定位于近端肾小管。本研究通过对尿液外泌体进行分选,检测分选前后外泌体miR-200b的表达,证实非近端小管来源的外泌体miR-200b可以作为肾纤维化的诊断标志物,分选可以提高诊断标志物的敏感性。