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子宫内膜异位症(EMs),简称内异症,虽是良性疾病,但有恶性肿瘤远处转移和侵袭的特性。近年来更多的学者关注于内异症在位子宫内膜的生物学特性,在位子宫内膜在宫腔以外生长,需要降解细胞外基质(ECM)和基底膜(BM),并生成新的血管以供给异位内膜生长所必须的营养,使EMs进一步进展。肿瘤坏死因子(TNF-α)能够促进血管内皮生成因子(VEGF)的生成,形成新的血管,基质金属蛋白酶3(MMP-3)能降解ECM,使异位内膜更具侵袭性,最终导致EMs的发生发展。本文就TNF-α和MMP-3与EMs的关系做一论述,分两部分进行论述。第一部分目的探讨MMP-3在EMs患者在位、异位内膜和子宫肌瘤患者内膜中的表达,探讨其在EMs发病机制中的作用。方法以EMs患者(病变位于卵巢,形成巧克力囊肿)40例作研究组,其中增生期20例,分泌期20例,征得患者同意,术前刮取患者在位子宫内膜,术后留取异位囊肿的囊壁。以子宫肌瘤患者40例内膜为对照组,其中增生期20例,分泌期20例。两组患者术前3月均未用甾体激素治疗。术后病理组织学检查证实为子宫内膜异位症和子宫平滑肌瘤。所取标本经中性福尔马林液固定后石蜡包埋,待用。实验组与对照组子宫内膜中的MMP-3采用免疫组化SABC方法测定,每批实验均同时设立阳性对照与阴性对照。检测结果每一个标本的取样和分级都由病理科经验丰富的两位医生在显微镜下进行,并实行双盲。切片被第一个观测者打分,然后被第二个观测者证实。选取切片中有异位子宫内膜腺体者,腺上皮细胞及间质细胞胞浆中出现棕黄色或褐色颗粒为阳性。根据细胞染色强度和染色细胞所占百分率的得分之和除以2进行评估:(1)阳性细胞百分率:无细胞显色或阳性细胞数<5%为0;5%-35%细胞显色为1;36%-65%细胞显色为2;>65%细胞显色为3;(2)显色深浅:不显色或显色不清为0;浅黄色为1;棕黄色为2;深褐色为3。将二者的评分相加除以2,作为该切片的最终评分:将0、0-1、1.5 -3分分别定为阴性(-)、阳性(+)、强阳性(++)。分析结果采用SPSS11.5软件进行两样本秩和检验,以P<0.05为差异有显著性。结果MMP-3主要定位于子宫内膜的腺上皮细胞及内膜间质细胞的胞浆中。在异位内膜中,其阳性染色强度均较强,以(+)-(++)为主,呈棕黄色或棕揭色,明显强于子宫肌瘤内膜(P<0.05),差异有显著性。MMP-3在EMs患者异位内膜中的染色强度也强于在位内膜,(P<0.05),差异有显著性。MMP-3在正常子宫内膜组中增殖期的表达强于分泌期(P<0.05) ,差异有显著性。结论EMs患者异位子宫内膜MMP-3的表达明显较对照组高,且高于同一患者在位子宫内膜中MMP-3的表达,说明异位子宫内膜降解ECM、BM的能力增强,更富有侵袭力,向黏附部位的深层浸润,使EMs进一步发展。第二部分目的测定TNF-α和MMP-3在EMs患者血清中的含量,探讨TNF-α和MMP-3在EMs发病机制中的作用及与疾病的关系。方法入选对象为第一部分的患者,同时抽取实验组和对照组患者术前清晨空腹肘静脉血3ml,室温静置2 h后,台式离心仪2500转,5分钟分离血清,Eppendorf管分装,贮存于-80℃冰箱中,待测。采用ELISA法,严格按试剂盒说明的实验步骤检测,仪器为芬兰生产的Labsystems wellscan K3全自动酶标仪,波长450 nm,根据试剂盒内给的标准品,配制好浓度,在450 nm的酶标仪上读出OD值(读出的每一个OD值应该减去0孔对应的OD值),应用EXCEL计算出标准的方程,然后根据OD值在标准曲线算出相应的TNF-α和MMP-3的浓度。统计学方法采用SPSS11.5软件进行两样本t检验。结果TNF-α在实验组血清中的含量明显高于对照组(P<0.05),差异有显著性。MMP-3在实验组血清中的含量也明显高于对照组(P<0.05),差异有显著性。结论一方面TNF-α通过自身炎性细胞因子的作用加速EMs的发生发展,诱导腹腔间皮细胞表达黏附分子,使内膜基质细胞黏附在腹腔间皮细胞,促进内膜间质细胞的生长和VEGF的分泌,另一方面,通过MMP-3的含量的增高,加强对异位内膜的水解与ECM的破坏,协同参与EMs的发病。