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第一部分组蛋白H3K4me3在中耳胆脂瘤中的表达目的:量化组蛋白H3赖氨酸4的三甲基化(H3K4me3)在中耳胆脂瘤母组织及外耳道上皮组织中的表达,以研究其在中耳胆脂瘤发生、发展过程中的重要意义。方法:收集2017年9月到2018年6月我院耳鼻咽喉头颈外科收治的中耳胆脂瘤患者30例,以中耳胆脂瘤患者的胆脂瘤母组织为实验组,及同一患者的外耳道上皮组织为对照组,根据免疫印迹实验(Western blot)结果分析H3K4me3的表达水平;得到Western blot结果后,进行免疫组织化学染色实验验证Western blot实验结果,并定位H3K4me3在实验组和对照组中的表达。结果:1.免疫印迹实验结果显示组蛋白H3K4me3在胆脂瘤母组织中的表达水平的明显低于外耳道上皮组织,两者差异有统计学意义。2.免疫组织化学染色结果显示组蛋白H3K4me3在胆脂瘤上皮组织以及外耳道上皮组织中均有表达,定位于胆脂瘤上皮组织以及外耳道上皮组织细胞核中,表现为上皮组织细胞核中棕黄色或棕褐色颗粒;胆脂瘤母组织中组蛋白H3K4me3的表达量明显低于外耳道上皮组织,两者差异有统计学意义。结论:组蛋白H3K4me3在中耳胆脂瘤上皮组织中表达明显下调,可能参与了中耳胆脂瘤发生和发展过程,其有可能成为治疗中耳胆脂瘤的新靶点。第二部分组蛋白H3K4me3甲基化酶及去甲基化酶在中耳胆脂瘤中的表达目的:筛选影响中耳胆脂瘤上皮组织中组蛋白H3K4me3表达异常的主要因子。方法:收集2017年9月到2018年6月我院耳鼻咽喉头颈外科收治的中耳胆脂瘤患者13例,以中耳胆脂瘤患者的胆脂瘤母组织为实验组,及同一患者的外耳道上皮组织为对照组,通过RT-qPCR检测两组标本中JARID1家族(JARID1A,JARID1B,JARID1C,JARID1D),MLL家族(MLL1,MLL2,MLL3,MLL4,SETD1A/B),MLL5以及SET7/9各基因mRNA表达水平,进行相对定量分析,筛选出影响H3K4me3表达差异的可能因子。结果:荧光定量逆转录聚合链反应(RT-qPCR)结果显示组蛋白H3K4me3特异性甲基转移酶MLL家族多种基因在中耳胆脂瘤母组织中表达呈下降趋势,其中包括MLL1、MLL2、MLL5和SETD1A等;其特异性去甲基化酶在中耳胆脂瘤母组织中表达无明显差异。结论:组蛋白H3K4me3在中耳胆脂瘤组织中下调可能是MLL1、MLL2、MLL5和SETD1A等多种特异性甲基转移酶共同作用的结果。