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植物内生拮抗芽孢杆菌是一类定殖于健康植株中并与植物建立和谐关系的一类微生物,具有抗病、促生、提高植物抗逆能力等多种生物学功能。近年来,国内相继对多种植物内生菌的分类地位、抑菌活性、促生作用等进行了研究。本研究对番茄、辣椒等植物体内的拮抗内生细菌进行了分离筛选,并对其分泌的抗菌物质的类型、抑菌活性及抑菌特点进行了研究,获得了以下研究结果:1.对番茄、辣椒等植物的茎部及叶部的内生细菌进行了分离筛选,得到了对梨黑斑病菌等多种植物病原真菌具有较好的拮抗作用菌株19株,通过对峙培养测定,19株细菌对梨黑斑病菌的抑菌活性在58.3%-86.7%之间,其中Fq23对梨黑斑病菌的抑菌率为86.7%,Fxj82对梨黑斑病菌的抑菌率为80%,XJ5对梨黑斑病菌的抑菌率为75%,X8、X18、X25、Fq153菌株对梨黑斑病菌的抑菌率为63.3%。2.采用有机溶剂萃取、硅胶柱层析及生长速率法检测的方法对Fxj5及Fxj82菌株的抗菌粗物质进行了分离和纯化,结果表明:氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、环己酮、石油醚等5种有机溶剂的萃取液对梨黑斑病菌和辣椒疫病菌的抑菌活性存在差异,其中环己酮萃取效果好,Fxj5萃取物对梨黑斑病菌和辣椒疫病菌的抑菌率分别为79%和81%,Fxj82萃取物对梨黑斑病菌和辣椒疫病菌的抑菌率分别为83%和77%。经柱层析后Fxj5获得4个馏分,其抑菌率分别为29%、58%、20%、28%,Fxj82获得4个馏分,其抑菌率分别为54%、30%、22%、20%,表明抗菌物质得到了较好的分离。3.芽孢杆菌XJ5、XJ6、FQ23和X8菌株产生的抗菌物质主要为抗菌蛋白,为分离纯化其抗菌物质,采用饱和度分别为40%、50%、60%、70%、80%的硫酸铵进行盐析,以梨黑斑病菌为指示菌,生长速率法测定各饱和度硫酸铵盐析所得沉淀蛋白的抑菌活性,并对4种拮抗蛋白的抑菌活性进行了比较。研究结果表明:XJ5、XJ6、FQ23、X8的最佳硫酸铵盐析浓度分别为80%、40%、60%、80%。其中X8菌株次级代谢产生的抗菌蛋白抑菌效果较好,其对梨黑斑病菌、辣椒疫病菌、黄瓜枯萎病菌的抑菌率分别为71.68%、83.46%、87.94%。4.以梨黑斑病菌为指示菌分别测定了 4种抗菌蛋白对病原菌菌丝及孢子萌发的影响。研究结果表明:经XJ5抗菌蛋白处理的菌丝悬浮液,在48 h后达到最大值,其OD260、OD280值分别为1.748、1.829,经XJ6抗菌蛋白处理的菌丝悬浮液,在24h后达到最大值,OD260、OD280值分别为1.654、1.8,经X8抗菌蛋白处理菌丝悬浮液,在48h后达到最大值,其OD260、OD280值分别为2.087、1.993,经FQ23抗菌蛋白处理的菌丝悬浮液,在48 h后达到最大值,OD260、OD280值分别1.933、1.79,结果表明所提取芽孢杆菌抗菌蛋白对病菌的细胞膜通透性造成一定影响,造成菌体内核酸及蛋白大量外泄,研究还表明经抗菌蛋白处理的梨黑斑病菌菌丝扭曲、畸形,经蛋白酶液处理的梨黑斑病菌的分生孢子不能正常萌发。