目的:TGF-β信号通路已被证实与多种癌症的发生发展息息相关,且在不同的癌症中,以及在不同分子的调控下,发挥的作用也不尽相同。此项研究旨在证实,在转录因子TRAF2的介导下,TGF-β信号通路是否能够调控肝癌细胞的迁移。方法:1.向正常huh7肝癌细胞中加入10ng/ml TGF-β处理不同时间后,测定TRAF2表达量的变化。2.用慢病毒将huh7肝癌细胞的TRAF2基因敲低,作为实验组;不做任何处理或导入空载质粒Scramble的huh7肝癌细胞为对照组。分别加入等剂量10ng/ml TGF-β处理相同时间之后,用于(1)细胞划痕实验;(2)蛋白免疫印迹测定TGF-β信号通路下游信号分子的表达情况;(3)免疫共沉淀技术测定蛋白相互作用情况。结果:1.在加入TGF-β处理后的正常huh7肝癌细胞中,TRAF2的表达量随着处理时间的增加而逐渐降低。2.在细胞划痕实验中,未加入TGF-β时,TRAF2基因敲低组肝癌细胞迁移速度略快于正常组huh7肝癌细胞;加入TGF-β处理之后,TRAF2基因敲低组肝癌细胞迁移速度明显快于正常组huh7肝癌细胞。3.加入TGF-β处理之后,TRAF2基因敲低组P-SMAD3蛋白表达量低于正常huh7肝癌细胞组,而总SMAD3蛋白表达无差异,其余信号分子蛋白表达无差异。4.免疫共沉淀显示TRAF2不与SMAD3蛋白结合。结论:1.TGF-β抑制TRAF2的表达。2.TRAF2抑制TGF-β诱导的肝癌细胞迁移。3.TRAF2调控TGF-β信号通路中的SMAD信号通路,促进SMAD3蛋白磷酸化为P-SMAD3,对non-SMAD信号通路无影响。4.TRAF2与SMAD3蛋白无直接相互作用。