目的:PDAC（Pancreatic Ductal Adenocarcinoma,胰腺导管腺癌）,是公认的高度恶性的肿瘤之一,五年总体生存率仅为9%。手术切除后的辅助化疗通常是治疗早期胰腺癌的首选方案。自从吉西他滨1997年被批准用于临床治疗,该药已经被广泛运用于胰腺癌的临床一线治疗,并开发了以吉西他滨为基础的多种联合治疗方案。近年来,尽管吉西他滨广泛使用,但其耐药进展的机制仍缺乏明确的解释。本研究拟通过研究化疗前后胰腺癌肿瘤内部发生的变化,找出吉西他滨敏感的靶点,并探讨该方法用于指导临床治疗方案选择的可行性,为预测胰腺癌病人对吉西他滨化疗敏感性提供新思路。方法:将临床上可切除胰腺癌病人术后的肿瘤组织通过种植于免疫缺陷鼠皮下构建PDX动物模型,待肿瘤成功种植并生长至500-800mm3后处死小鼠并取肿瘤组织,通过HE染色、免疫组化、分子生物学、基因表达谱、代谢组学等来评价移植物肿瘤和原代肿瘤之间的关系,证实PDX移植瘤保持了原代肿瘤的生物学特性。选取成功建立的小鼠胰腺癌PDX动物模型进行化疗筛选,随机将小鼠分为治疗组和对照组,分别给予吉西他滨和生理盐水治疗。通过对胰腺癌PDX动物模型的筛选,找出一个对吉西他滨治疗异常敏感的个体。将其化疗后的肿瘤组织和对照组未化疗的肿瘤组织分别消化提取细胞,进行单细胞转录组测序（采用10×Genomics平台）,使用Cell ranger、Seurat、Cluster Profiler、sc-Velo等软件进行数据分析,比较两组之间细胞亚群的变化和基因表达的差异。结果:构建PDX（Patient-derived xenograft,人源移植瘤）动物模型并经过病理证实后,共有17位胰腺癌患者来源的PDX模型被用于吉西他滨化疗筛选实验,不同病人来源的PDX模型对吉西他滨的化疗呈现不同的敏感性。进一步吉西他滨治疗前后的肿瘤标本单细胞转录组测序的结果显示,肿瘤治疗前后的细胞图谱,吉西他滨的治疗显著改变了肿瘤内的细胞亚群的组成和比例,肿瘤内的吉西他滨敏感细胞亚群减少并保留了非敏感细胞,利用治疗前后的基因的转录水平与对治疗的敏感性的联系寻找出可以预测PDAC耐药的基因。结论:本研究结果揭示了吉西他滨化疗在胰腺癌患者个体间的敏感性具有差异,化疗重构了肿瘤内部的异质性,改变了肿瘤内部细胞亚群的比例,增加了耐药肿瘤细胞亚群的数量,促进了肿瘤耐药的发生,从而为胰腺癌病人临床治疗方案的选择提供了依据。