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开花是植物个体发育过程的中心环节,如何提早开花和缩短童期对于经济林木的育种和栽培具有十分重要的现实意义。枣(Zizyphus jujube.Mill)是我国第一大干果和重要的经济树种,其童期较短,一般当年种植当年就可开花结果;菲油果(Feijoa sellowiana)是一种集食用、观赏、绿化于一体的新型果树品种,其童期较长,一般要3-4年才开花。本文以枣和菲油果为试材,利用常规PCR和染色体步移技术,分别克隆和比较研究了花分生组织形成的关键基因LFY在不同童期植物枣和菲油果中的基因组DNA及其启动子序列;并且通过荧光定量PCR技术,对LFY基因在枣和菲油果中的表达模式进行探讨,旨在为LFY基因在枣和菲油果成花中的影响差异提供一些有益的探讨。主要的研究结果如下:1.枣和菲油果LFY基因的基因组DNA序列的克隆和比较分析。分别以梨枣和’Opal Star’菲油果的结果枝幼嫩叶片为试材提取DNA,利用软件Primer Premier5.0设计特异引物,利用常规PCR技术进行扩增,并回收、连接、转化、测序。结果表明:经过拼接分析得到枣和菲油果LFY的基因组DNA序列,它们均包含两个内含子和三个外显子,不同点如下:(1)其相似性只有28%,说明它们同源性比较低;(2)基因组DNA的长度不同,梨枣是2586bp,菲油果是1243bp;(3)内含子的片段长度和位置不相同,梨枣第一个内含子在基因组459bp的位置,长度为200bp,第二个内含子在基因组1042bp的位置,长度为1177bp。而菲油果第一个内含子在基因组332bp的位置,长度为63bp,第二个内含子在基因组745bp的位置,长度为109bp;(4)枣LFY基因内含子长度均大于菲油果的内含子长度。2.枣和菲油果LFY基因的表达模式比较研究。利用荧光定量PCR技术,研究LFY基因在枣和菲油果花蕾发育不同时期以及营养枝和结果枝的叶片、叶芽和幼嫩茎段中的表达量。结果显示在枣和菲油果中,LFY基因的表达量随着花蕾发育的不同时期而发生变化,其在梨枣第四期花蕾中最高,是其最低表达量(第五期花蕾中)的12倍;而菲油果是在第二期花蕾中最高,是其最低表达量(第三期花蕾中)的126倍。在其它组织器官中,枣和菲油果LFY基因的表达量均是在茎段中最高,其次是叶芽,最后是叶片。在枣结果枝茎段中的表达量最高,是结果枝叶片(表达量最低)中的8倍,在菲油果营养枝茎段中的表达量最高,是结果枝叶片中(表达量最低)的19倍。3.枣和菲油果LFY基因的启动子序列克隆。根据枣和菲油果LFY的基因组DNA序列设计特异引物,运用染色体步移技术,仅成功克隆得到了菲油果LFY基因的部分启动子序列,长度为2436bp,包括一些环境胁迫、激素和水分应答等元件,这些作用元件的构成表明,在菲油果中LFY基因的表达受到多种外界环境信号的调控,而且还参与不同生长阶段的生理过程。