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目的:Disabled-2(简称Dab2),是一种可负向调控Wnt信号通路的多功能衔接蛋白。先前研究发现Dab2在肺癌中表达下调,并与肺癌的进展和不良预后正相关,转染Dab2可以明显抑制肺癌细胞中Wnt通路的活性。DNA连接酶Ⅳ(简称LIG4),在大肠癌中作为Wnt通路靶基因,主要参与DNA损伤后非同源末端连接(NHEJ)修复。因此,我们猜测Dab2是否可通过Wnt/β-catenin信号通路下调LIG4的表达,进而抑制肺癌细胞的DNA双链断裂(DSB)后的损伤修复能力,从而增加肺癌细胞的放疗敏感性。研究方法:免疫组织化学染色检测了103例肺癌组织标本Dab2和LIG4的表达,并分析两者表达的关系及其与临床病理因素和患者预后的关系。构建野生型Dab2及突变型Dab2质粒(Dab2-PTB和Dab2-ΔPTB),并利用Dab2 siRNA,Wnt通路抑制剂iCRT-14和LIG4抑制剂SCR7,双向调控Dab2的表达和Wnt通路的活性。通过Western Blot检测Dab2,Wnt通路因子,LIG4及磷酸化γ-H2AX表达情况,用免疫荧光观察磷酸化γ-H2AX焦点数以判断X-ray照射后DNA的损伤修复情况,采用克隆形成实验、基质胶侵袭实验判断肺癌细胞照射后放疗增敏的情况。结果:免疫组化表明Dab2低表达(及LIG4高表达)与肺癌的低分化、高TNM分期、淋巴结转移及不良预后呈正相关。Western Blot结果显示经X-ray照射后,过表达Dab2和Dab2-PTB下调Wnt通路关键分子β-catenin,下调下游靶基因cyclinD1,MMP-7及LIG4的表达(P<0.05),促进磷酸化γ-H2AX表达上调(P<0.05);而转染Dab2-ΔPTB则上述因子没有明显变化。应用siRNA敲除A549中Dab2的表达后,明显上调了β-catenin、cyclinD1、MMP-7和LIG4的表达,而磷酸化γ-H2AX表达下调(P<0.05),这种变化在联合应用iCRT-14被明显逆转(P<0.05)。克隆形成实验及Transwell侵袭实验表明,在H1299细胞中转染野生型Dab2和突变体Dab2-PTB,经X-ray照射后克隆形成率明显下调,而转染Dab2-ΔPTB则无明显变化。经siRNA和X-ray处理后的A549细胞,克隆形成率和细胞侵袭数下调不明显,而联合应用iCRT14和SCR7后,均出现了明显的下调(P<0.05)。结论:Dab2的低表达(LIG4的高表达)与肺癌的进展和患者的不良预后正相关;Dab2通过负向调控Wnt通路下调其靶基因LIG4的表达,抑制DNA损伤修复能力增敏肺癌放疗,Dab2基因可能成为临床增敏肺癌放疗的潜在靶点。