【摘 要】
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目的1探讨不同剂量X线照射对人食管鳞癌Ec9706细胞NADH脱氢酶活性的影响。2.分析6GyX线照射对线粒体DNA(mitochondrial DNA，mtDNA)复合物Ⅰ（NDl、ND2、ND3、ND4、ND4L、ND5）6种
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目的1探讨不同剂量X线照射对人食管鳞癌Ec9706细胞NADH脱氢酶活性的影响。2.分析6GyX线照射对线粒体DNA(mitochondrial DNA，mtDNA)复合物Ⅰ（NDl、ND2、ND3、ND4、ND4L、ND5）6种基因序列的影响。方法1.将人食管鳞癌细胞株EC9706进行体外培养，分别用2Gy、4Gy、6Gy、8Gy五个剂量照射。照射之后提取线粒体并测定线粒体酶活性，选取最佳剂量组。2.用6GyX线照射Ec9706细胞后，提取mtDNA，利用PCR技术扩增，纯化PCR产物，并将PCR产物回收，纯化。3.对mtDNA的NDl、ND2、ND3、ND4、ND4L、ND56种基因进行基因测序。4.并用DNA序列分析软件对NDl、ND2、ND3、ND4、ND4L、ND5的变异情况进行对比分析。结果1.据统计结果分析：经2Gy、4Gy、6Gy、8Gy不同剂量照射后，各组之间NADH脱氢酶活性有显著性差异(P<0．05)，6Gy组NADH脱氢酶活性显著低于其它四组（P<0.01）。2.经6Gy X线照射后，mtDNA的NDl、ND2、ND3、ND4、ND4L、ND56种基因序列没有变化。结论1.经2Gy、4Gy、6Gy、8Gy X线照射后，Ec9706细胞NADH脱氢酶活性都低于未照射组，从2Gy到6Gy，随着剂量增加酶活性逐渐降低，在6Gy剂量时降到最低，当剂量逐渐增大到8Gy，酶活性虽然低于对照组，但不再继续降低。进一步证实了照射可以影响线粒体的氧化磷酸化功能。2.6GyX线照射对Ec9706细胞mtDNA复合物Ⅰ（NDl、ND2、ND3、ND4、ND4L、ND5）6种基因序列没有造成影响。
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