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目的： 近年来慢性肾病的发病率和患病率逐年升高。肾小管间质损伤及肾纤维化是各种病因引起慢性肾病的共同途径和主要病理基础。众多研究显示，单核-巨噬细胞相关的炎症反应在肾小管间质损伤及肾纤维化发生发展过程中起着重要作用。近来研究显示盆垂草提取物（Sedum Sarmentosum Bunge extra,SSBE）具有抗炎及免疫抑制等作用。然而SSBE是否可以通过抑制单核-巨噬细胞相关的炎症反应，特别是抑制巨噬细胞移动抑制因子（migration inhibitory factor MIF），从而达到抗肾小管间质损伤及肾纤维化中的作用尚未进一步研究证实。 本研究构建大鼠肾间质损伤经典模型缺血/再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury，IRI)及单侧输尿管梗阻（unilateral ureteral obstruction,UUO）动物模型，采用不同浓度的SSBE进行干预。同时从体外实验角度，培养大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E，应用马兜铃酸（aristolochic acid，AA）进行损伤实验，同样采用不同浓度的SSBE或MIF抑制剂ISO-1进行干预。本研究旨在： 1.探索SSBE对IRI及UUO引起的肾间质损伤的影响，并证实SSBE是通过抑制单核巨噬细胞相关炎症因子的表达和释放来达到其抗肾损伤的作用。 2.阐明SSBE能抗AA诱导的肾间质损伤及肾纤维化，抑制上皮细胞-间充质转化（EMT）的发生和细胞外基质（ECM）的形成。 3.进一步探索巨噬细胞MIF及其受体在SSBE在抗肾间质损伤及肾纤维化中的可能作用。 方法 将IRI大鼠分为4个实验组： （1）对照组：进行IRI假手术； （2）IRI24h组； （3）IRI低剂量SSBE治疗组（10 mg/kg·d）； （4）IRI高剂量SSBE治疗组（100 mg/kg·d）。 UUO大鼠同样分为4个实验组： （1）对照组： 进行UUO假手术； （2）UUO3d组； （3）UUO低剂量SSBE治疗组（10 mg/kg·d）； （4）UUO高剂量SSBE治疗组（100 mg/kg·d）。 通过以下方法检测： 1.病理学方法观察IRI及UUO肾小管及间质损伤程度； 2.免疫组化染色方法探索肾损伤后肾组织巨噬细胞浸润情况； 3.定量芯片测定方法检测肾损伤后血清IL-1β、IL-6、IL-10、IFN-γ及 MCP-1等多种炎症因子表达的影响； 4.免疫组化方法探索SSBE对肾损伤后肾组织MIF及其受体CD74的表达情况。 将体外培养的肾小管上皮细胞（NRK-52E），分为4个实验组： （1）对照组：未加入AA和SSBE； （2）AA损伤组（10μg/ml）； （3）低剂量SSBE干预组（AA10μg/ml+SSBE10μg/ml）； （4）高剂量SSBE干预组（AA10μg/ml+SSBE100μg/ml）。 1.细胞免疫荧光染色方法及Real time RT-PCR分别检测MIF蛋白及mRNA的表达； 2.Western Blot方法检测MIF、III型胶原蛋白的表达。 将体外培养的NRK-52E分为4个实验组： （1）对照组：未加入AA和MIF抑制剂ISO-1； （2）AA损伤组（10μg/ml）； （3）低剂量ISO-1干预组（AA10μg/ml+ISO-110μg/ml）； （4）高剂量ISO-1干预组（AA10μg/ml+ISO-1100μg/ml）。 Western Blot方法检测促进转化生长因子-β1（TGF-β1）、上皮细胞标志物钙黏蛋白（E-cadherin）、肌成纤维细胞标志物α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）以及MIF、III型胶原蛋白等的表达。 结果： 1. SSBE抑制肾组织损伤程度以及炎症细胞浸润：病理显示IRI及UUO均引起肾小管及间质损伤及单核-巨噬细胞的浸润；而 SSBE可显著减轻上述损伤，并抑制单核-巨噬细胞的浸润。 2. SSBE抑制肾损伤后的炎症反应：定量芯片测定结果显示IRI及UUO均引起血清IL-1β、IL-6、IL-10、IFN-γ及MCP-1等炎症因子表达及释放显著增加，SSEB剂量依赖性地抑制上述炎症因子的表达。免疫组化结果显示IRI及UUO均显著上调肾组织MIF及其受体CD74表达；SSBE有效抑制了肾损伤后上述因子的表达。 3. SSEB干预 AA诱导的肾小管上皮细胞炎症反应以及 ECM成分的累积：Real-time RT-PCR及Western Blot结果显示，SSBE剂量依赖性地抑制AA诱导的NRK-52E细胞的MIF的高表达。Western Blot检测结果还显示,SSBE抑制了AA诱导的NRK-52E细胞III型胶原蛋白的高表达。 4. MIF抑制剂ISO-1干预AA诱导肾小管上皮细胞EMT的发生：Western Blot检测结果显示，AA作用于NRK-52E细胞24h后，E-cadherin蛋白表达下降，α-SMA蛋白表达上调，以及MIF及III型胶原蛋白的表达显著增高。而MIF抑制剂ISO-1干预可抑制上述改变。 结论： 1.IRI及UUO诱导肾组织损伤、炎症细胞浸润以及炎症相关因子的表达及释放，而SSBE可以抑制上述改变，提示SSBE可能通过抑制MIF等炎症因子发挥其抗肾组织损伤及炎症作用。 2.SSBE抑制AA诱导的MIF表达和ECM积累；而MIF抑制剂ISO-1同样可以抑制AA诱导的EMT转变和ECM累积。这些结果同样提示SSBE可能通过抑制MIF而发挥其抗肾间质损伤及抗肾纤维化的作用。