目前,利用RNA干涉文库进行大规模、高通量的功能基因扫描已成为发现新功能基因的重要方式和手段。因此我们希望通过构建限制性siRNA干涉文库扫描在细胞增殖和分化过程中具有重要作用的新功能基因。通过对原有siRNA表达载体进行改造,我们构建了新的双启动子siRNA表达载体；根据斯坦福大学2004年公布的在人类胚胎干细胞与造血干细胞增殖、分化过程中具有潜在功能的基因芯片分析结果(http：//smd-www.stanford.edu/cgi-bin/source/sourceResult.html.),我们构建了与细胞增殖和分化相关基因siRNA干涉文库。 该文库目前包括靶向多个基因的载体,如转录因子、各类蛋白激酶、细胞周期调控蛋白以及一些未知功能基因在内的225个基因。利用这个限制性RNA干涉文库,我们对控制细胞增殖的基因进行筛选。通过WST-1高通量扫描,我们发现了若干同细胞增殖相关的基因:CNKSR3(Homo sapiens CNKSR family member 3)和Fosl2 (Homo saoiensFOS-like antigen 2),扫描结果证实：沉默CNKSR3会促进细胞的增殖,而沉默Fosl2则抑制细胞的增殖功能。在随后的研究中,我们发现过表达CNKSR3.基因会抑制细胞的增殖能力。我们在HeLa、293T、Siha等细胞系中也得到了类似的结果。因此我们推测:CNKSR3在细胞增殖过程中具有重要的生物学功能。