【摘 要】
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人参(Panax ginseng C.A.Mey)和西洋参(Panax quinquefolium L.)拥有很高的药用价值,由于近年来野生资源匮乏,再加上人工种植栽培时间长,受多种环境因素影响,难以满足人们的需要。通过使用组织培养等技术诱导和大规模生产不定根,将不定根作为药物原料是缓解人参皂苷供给不足的有效手段。本研究旨在建立人参、西洋参不定根直接诱导体系并初步探讨了不定根形成过程中营养物质含量
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人参(Panax ginseng C.A.Mey)和西洋参(Panax quinquefolium L.)拥有很高的药用价值,由于近年来野生资源匮乏,再加上人工种植栽培时间长,受多种环境因素影响,难以满足人们的需要。通过使用组织培养等技术诱导和大规模生产不定根,将不定根作为药物原料是缓解人参皂苷供给不足的有效手段。本研究旨在建立人参、西洋参不定根直接诱导体系并初步探讨了不定根形成过程中营养物质含量和相关酶的活性变化;优化液体增殖培养条件,通过改变培养基中蔗糖浓度、盐浓度及生长素浓度,了解它们对不定根生长和皂苷含量的影响,为人参、西洋参不定根材料的快速获得和大规模培养提供一定的理论依据,以期为工业化生产人参皂苷提供参考和数据支持。研究结果表明:1.在不同消毒剂和消毒时间组合处理中,人参、西洋参的叶片外植体0.1%升汞消毒15 min,种子0.1%升汞两步消毒法消毒20 min,茎段0.1%升汞两步消毒法消毒15 min处理消毒方式最好,存活率最高,基本不会出现污染现象。2.建立了人参、西洋参不定根诱导体系:确定了人参不定根诱导最佳培养条件为MS培养基+0.8%琼脂+3%蔗糖。种胚添加0.6 mg/L NAA+1.0 mg/L IBA时,诱导率最高为88.42%;叶片添加0.8 mg/L NAA+1.0 mg/L IBA时诱导率最高,为68.88%;茎段添加1.0mg/L NAA+1.0 mg/L IBA诱导率最高为35.34%。西洋参不定根诱导最佳培养条件为1/2MS+0.7%琼脂+2%蔗糖。种胚添加0.4 mg/L NAA+0.4 mg/L IBA时,诱导率最高为78.33%;叶片添加0.6 mg/L NAA+0.4 mg/L IBA时,诱导率最高为64.23%;茎段添加0.6 mg/L NAA时诱导率最高为56.77%。3.在人参、西洋参的离体叶片直接诱导不定根过程中,随着培养时间的增加,POD活性呈上升-下降-上升-下降的变化,PPO活性呈上升-下降-上升的趋势;IAAO活性先降低后升高,可溶性蛋白含量呈下降-上升-下降-上升的趋势,可溶性糖含量先先降低后升高而后又降低。4.人参、西洋参不定根液体增殖培养条件的优化,结果表明:人参不定根最佳培养条件为MS培养基、3%蔗糖,此时其生物量和皂苷产量最高;西洋参不定根为1/2MS培养基、2%蔗糖时其生物量和皂苷产量最高。5.在最佳培养条件的基础上研究生长素NAA、IBA及其组合浓度对人参、西洋参不定根生长和皂苷含量的影响,结果表明:IBA相比于NAA更有利于不定根的生长。人参不定根分别在添加单一生长素NAA 2 mg/L、IBA 1 mg/L和二者组合浓度NAA 1 mg/L+IBA1 mg/L时,根系活力最好,其生物量和皂苷产量达到最大值,并显著高于其对照组。西洋参不定根分别在添加单一生长素NAA 4 mg/L、IBA 0.5 mg/L和二者组合浓度NAA 1mg/L+IBA 0.5 mg/L时,根系活力最好,其生物量和皂苷产量最高,并显著高于其对照组。且在不同生长素浓度处理下,人参、西洋参不定根生物量与氮元素、磷酸盐、钾离子吸收浓度呈正相关。
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