论文部分内容阅读
沉香是瑞香科（Thymelaeceae）沉香属（Aquilaria）或拟沉香属（Gyrinops）植物受伤后所产生的含树脂的木材。研究表明沉香具有抗炎、神经保护、细胞毒、抑制乙酰胆碱酯酶等生物活性。目前在国际上交易的沉香主要来源于四种沉香属植物,分别为Aquilaria sinensis（Lour.）Gilg,Aquilaria malaccensis Lam.,Aquilaria crassna Pierre ex Lecomte和Aquilaria filaria（Oken）Merr.。2-（2-苯乙基）色酮和倍半萜类化合物作为沉香的特征性成分主要报道于前三种植物所产沉香,而来源于A.filaria的沉香（丝沉香）却鲜有报道。为了更加系统的研究沉香,探究丝沉香与其他沉香化学成分的差异,本文选取产自印度尼西亚的丝沉香为研究对象,采用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱和高效液相色谱等多种现代分离纯化技术,从丝沉香中分离得到90个化合物（1-90）;通过核磁共振、高分辨质谱、红外和紫外等波谱学鉴定其结构,其中28个新化合物的结构分别为（4R）-3-oxo-gweicurculactone（1）,（4R,5S）-3-oxo-5,6-dihydro-gweicurculactone（2）,1（5）-ene-7,10-epoxy-guaia-12-one（3）,1,8-epoxy-5H-guaia-9-en-12,8-olide（4）,15-hydroxy-guaianolide（5）,4β,5β,7β,8β,11α-H-10α-hydroxy-guaia-1（2）-en-12,8-olide（6）,4α,5β,7α,8β,11α-H-10α-hydroxy-guaia-1（2）-en-12,8-olide（7）,4β,5β,8α,11α-H-7β,10α-dihydroxy-guaia-1（2）-en-12,8-olide（8）,4β,5β,8α,11α-H-7β,10β-dihydroxy-guaia-1（2）-en-12,8-olide（9）,4β,7α-H-11,13-dihydroxy-eremophil-1（2）,9（10）-dien-11-methy ester（10）,11-（2,2-dimethyl-1,3-dioxane-5-yl）-4β,7α-H-eremophil-9（10）-ene-11-ol（11）,4β,7β,8β-H-eremophil-9（10）-ene-8,12-epoxy-11α-ol（12）,5β,7β-H-12β-hydroxy-daphnauranol C（13）,（R）-6-羟基-2-（1-羟基-2-苯乙基）色酮（14）,（S）-6-羟基-2-（1-羟基-2-苯乙基）色酮（15）,6-羟基-8-甲基亚砜基-2-（2-苯乙基）色酮（16）,5,8-二羟基-2-[2-（2-羟基苯）乙基]色酮（17）,5,8-二羟基-2-[2-（4-羟基苯）乙基]色酮（18）,6,7-二羟基-2-[2-（3-羟基苯）乙基]色酮（19）,6,7-二羟基-2-[2-（2-羟基苯）乙基]色酮（20）,6,7-二羟基-2-[2-（4-羟基苯）乙基]色酮（21）,6,7-二羟基-2-[2-（3-羟基-4-甲氧基苯）乙基]色酮（22）,6,7-二羟基-2-[2-（4-羟基-3-甲氧基苯）乙基]色酮（23）,6-羟基-2-[2-（3-羟基苯）乙基]色酮（24）,8-羟基-2-[2-（4-甲氧基苯）乙基]色酮（25）,5-羟基-2-[2-（3-羟基-4-甲氧基苯）乙烯基]色酮（26）,（5R,6R,7R,8R）-8-氯-5,6,7-三羟基-5,6,7,8-四氢-2-[2-（3-羟基-4-甲氧基苯）乙基]色酮（27）,（6S,7S,8S）-6,7,8-三羟基-5,6,7,8-四氢-2-（2-苯乙基）色酮（28）。从结构上看,化合物1-13和29-34为倍半萜类化合物,14-28和35-63为色酮类化合物,64-90为其它类型化合物。化合物1-38,41,43-45,47-49和51-90为首次从丝沉香中报道。本研究测试了部分化合物的α-葡萄糖苷酶抑制活性、抗炎活性和细胞毒活性,发现化合物16-25,29和35-50对α-葡萄糖苷酶有不同程度的抑制活性,半数抑制浓度值(IC50)为7.8±0.3–253.2±9.7μM（阿卡波糖:743.4±3.3μM）,并对部分化合物进行酶动力学试验,发现部分flidersia类型2-（2-苯乙基）色酮（17,20–22,24,35,37,39-43和45-47）为α-葡萄糖苷酶的混合型抑制剂,倍半萜类化合物29为竞争性抑制剂,通过分子对接模拟29与酶的连接方式,发现化合物29与α-葡萄糖苷酶的氨基酸残基Arg 442结合成氢键,从而抑制酶的活性;抗炎活性测试结果表明化合物17,18,36,40,42和46-47在浓度为100μM时对脂多糖诱导的巨噬细胞RAW264.7的NO代谢抑制率大于50%（吲哚美辛:78.5±2.1,50μM）;细胞毒活性测试结果表明化合物2–4对K562有微弱的细胞毒活性,IC50分别为45.1±1.2,48.6±0.7和33.8±1.5μM（盐酸阿霉素:0.07±0.01μM）。综上所述,本论文通过对丝沉香乙醇提取物系统深入的化学成分和生物活性研究,分离鉴定了包括28个新化合物在内的90个化合物,提供了鉴定丝沉香的化学基础,扩充了沉香的化合物数据库,为丝沉香的开发利用提供了重要的科学依据。