选择源于禽致病性多杀性巴氏杆菌P₁₀₅₉（8：A）和C_48-1（5：A）链依型菌株Pst(P₁₀₅₉streptomycin-dependent mutant)和Cst(C_48-1streptomycin-dependentmutant)，分别以氨苄青霉素和卡那霉素诱导培育成遗传稳定的抗药性标记菌株Psa（Amp^r，Kan^s）和Csk（Kan^r，Amp^s）。以Psa菌株和Csk菌株为亲本，在DNaseⅠ始终存在的条件下，采用溶菌酶-EDTA法制备两亲本株原生质体，再以40％PEG4000为助融剂，进行原生质体融合，获得了4个链依型融合株（F3、F4、F7、F11）。融合株兼具氨苄青霉素和卡那霉素双抗特性，具有两亲本株的菌体血清型（8：A，5：A），符合两亲本株生化、形态、染色等特性。连续传代证明4个融合株的双亲遗传特性是稳定的。融合株F3免疫小鼠，14d后攻毒，实验小鼠对强毒株P₁₀₅₉和C_48-1的10个MLD的分别攻击和联合攻击保护率均达100％，有在鸡体进一步进行试验研究的价值。