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脂肪分化相关蛋白（ADFP）是一种细胞内脂质积聚及与脂肪细胞积聚相关疾病的灵敏而特异的指标。它在未分化的脂肪细胞中含量很低,在分化过程中急剧增加,而分化成熟后又逐渐被perilipin所代替。ADFP定位于脂滴表面,是脂滴结合蛋白PAT（Perilinpin,ADFP,TIP47）家族中的一员。猪ADFP的人类同源蛋白称为亲脂素（adipophilin）,它不仅参与脂质代谢,刺激脂质的聚集和脂滴的形成,而且在动脉粥样硬化,2型糖尿病的发生、发展中也可能起作用,因此已经引起研究者们的关注。 本文以猪为研究对象,从分子和细胞水平上对ADFP进行了基因克隆、染色体定位、组织分布及转录调控研究。首先通过RT-PCR扩增获得ADFP 1380 bp的全长cDNA编码区及719 bp C端非保守区,编码区核苷酸序列与已公布的猪cDNA序列享有99.4%的同源性,氨基酸序列则有4个氨基酸的不同。另外,与人、小鼠、大鼠、狗和牛ADFP分别享有85.9,76.8,75.2,86.8和82.7%的同源。证明ADFP具有很强的保守性,预示着其重要的生理作用。C端非保守区719-bp cDNA用限制性内切酶BamHI和XhoI消化后用以构建pGEX-ADFP-C表达载体,转化到BL21（ED3）中进行表达,得到具有免疫特异性的融合蛋白ADFP-GST,经SDS-PAGE和WB鉴定后,进行纯化并定量,作为抗原免疫新西兰白兔,获得兔抗猪抗血清;其二,根据人和小鼠基因结构以及与猪序列的同源性,设计特异引物,获得梅山猪第4、第5和第7内含子,与韩国本土猪ADFP基因结构比较发现,梅山猪在第4内含子上发生了276 bp的SINE的缺失;另外第7内含子上还存在一个SINE,这些SINE,尤其是缺失的SINE,可作为一种很有价值的时间标志,鉴定不同品系之间的进化关系;其三,应用辐射杂种细胞系技术将猪ADFP基因定位于1q21-q27,该结果与人猪比较图谱相一致;其四,通过RT半定量PCR,检测了猪9个组织ADFP mRNA水平上的组织分布和相对表达量,结果显示脑和脂肪组织的表达量最高,其后依次为睾丸、肝、心、脾、肠和肌肉,而肾脏中没有检测到信号,表明ADFP是广泛表达的;其五,培养COS-7细胞至最佳状态,用1×10-5,1×10-4M盐酸克伦特罗刺激COS-7细胞3小时后,对ADFP mRNA进行半定量检测,以未刺激的细胞为对照,当以1×10-5M浓度的盐酸克伦特罗刺激时,表达量明显下降至对照组的30%,而以1×10-4M盐酸克伦特罗刺激时,表达量为对照组的112%,验证了ADFP在脂质积累中的作用。