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济源冬凌草中所含的具有20-O对映贝壳杉烷结构的活性二萜成份有多种药理学活性，其中最具有代表性的冬凌草甲素不仅在抗菌、抗病毒上有较好活性，而且对多种人类肿瘤细胞均具有良好的抗肿瘤活性。三氮唑是典型的含氮杂环，研究发现在某些化合物中引入三氮唑结构单元可以明显增强其生物活性。课题组前期曾以济源冬凌草甲素 JDA为基本母核，合成了引入三氮唑结构单元的4个系列的衍生物和相对应的3个系列不含母核结构的三氮唑类衍生物。本论文对以上7个系列的化合物进行了体外抗肿瘤活性的评价，并着重对其中活性最好的化合物JD1B-2F和JD1B-1L进行了进一步的体外抗肿瘤活性及作用机制的研究。主要工作如下： 1、以 JDA为阳性对照，MTT法用人胃癌细胞 MGC-803和人食管癌细胞Eca-109为模型对七个系列共65个化合物进行体外抗肿瘤活性的筛选。挑选出具有代表性的15个化合物分别用人胃癌细胞MGC-803、人食管癌细胞Eca-109、人肺癌细胞 A549、人前列腺癌细胞 PC-3、人乳腺癌细胞 MCF-7、人肝癌细胞SMMC7721为模型进行体外抗肿瘤活性的进一步评价。MTT法作用72h后检测体外抗肿瘤活性的结果显示：化合物JD1B-2F和JD1B-1L抗肿瘤活性最好，明显优于 JDA和TZD-1L并呈现出时间-浓度依赖关系，且对人肝癌细胞株SMMC7721具有一定的选择性。 2、用MTT法对化合物JD1B-2F、JD1B-1L及其母核JDA和TZD-1L在人肝正常细胞HL-7702、人肝肿瘤细胞HepG2、ZIP77、BEL-7402和SMMC7721模型中抗肿瘤作用的选择性进行进一步研究。结果显示：化合物 JD1B-2F和JD1B-1L对人肝癌细胞 SMMC7721有较强的细胞毒作用，而对人肝正常细胞HL-7702的毒性较低。 3、以 JDA为阳性对照，采用细胞划痕实验和平板克隆实验研究了化合物JD1B-2F、JD1B-1L和TZD-1L对人肝癌细胞SMMC7721迁徙和增殖能力的影响。结果显示：化合物JD1B-2F和JD1B-1L对人肝癌细胞株SMMC7721的迁徙和增殖能力都有很明显的抑制作用，且抑制作用明显强于TZD-1L和母核JDA。 4、通过细胞周期实验和细胞凋亡实验，研究了化合物JD1B-2F和JD1B-1L对人肝癌细胞 SMMC7721的抗肿瘤作用机制。结果显示：化合物 JD1B-2F和JD1B-1L能将人肝癌细胞SMMC7721明显的阻滞在G1期，且能明显的诱导肿瘤细胞的凋亡并呈现出剂量依赖关系。 5、通过Western blot实验在蛋白水平上研究了化合物JD1B-2F和JD1B-1L对人肝癌细胞SMMC7721的抗肿瘤作用与Wnt/β-catenin信号通路的关系。结果显示：化合物JD1B-2F和JD1B-1L及其母核JDA能明显抑制Wnt信号通路的表达，并通过上调E-cadherin从而影响膜上β-catenin蛋白的结合与EMT通路联系起来。化合物JD1B-2F和JD1B-1L对Wnt信号通路的调节作用强于母核JDA，而相应的不含母核的三氮唑衍生物TZD-1F和TZD-1L对Wnt/β-catenin信号通路无此影响。 综上所述，JDA衍生物均具有一定的体外抗肿瘤活性；化合物JD1B-2F和JD1B-1L及其母核 JDA可明显抑制肝癌细胞 SMMC7721的生长增殖和侵袭能力，对肿瘤细胞有明显的周期阻滞并诱导其凋亡；化合物 JD1B-2F和JD1B-1L的抗肿瘤作用与Wnt信号通路的抑制有关，且其母核JDA为活性基团，其相应的三氮唑单元无此抑制作用。