论文部分内容阅读
目的：建立甲基苯丙胺依赖大鼠模型,在甲基苯丙胺依赖大鼠侧脑室内注射载体H1介导白细胞介素2纳米颗粒(H1/PIL2),检测大鼠行为学改变、大鼠脑内人白细胞介素2表达及伏隔核多巴胺表达变化,探讨载体H1介导白细胞介素2纳米颗粒对甲基苯丙胺依赖大鼠的干预作用。方法：通过质粒扩增方法获取大量含有白细胞介素2(Interleukin-2, IL2)的质粒及含有绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein, GFP)的质粒,然后将载体H1分别和含有IL2、GFP的质粒结合,合成载体H1介导的白细胞介素2纳米颗粒(H1/PIL2)及载体H1介导的绿色荧光蛋白纳米颗粒(H1/EGFP).将SD大鼠95只,随机分为对照组(N=20),依赖一周组(N=25),四周组(N=25)和八周组(N=25)。三个依赖组又分为4个亚组：单纯MA依赖组(N=21)、MA依赖+假手术组(N=18)、MA依赖+H1/EGFP组(N=18)、MA依赖+H1/PIL2组(N=18)。利用脑立体定位仪准确定位侧脑室,钻孔、开颅,对MA依赖+H1/PIL2组实验大鼠侧脑室注射载体H1介导白细胞介素2纳米颗粒(100ul,2次/周)。对MA依赖+H1/EGFP组实验大鼠侧脑室注射载体H1介导的绿色荧光蛋白纳米颗粒(100ul,2次／周)。根据条件位置偏爱实验结果和刻板行为评分评价H1/PIL2处理后大鼠的行为学变化；酶联免疫法检测大鼠六个脑区人白细胞介素2的表达及伏隔核多巴胺含量变化。结果：1、大鼠注射甲基苯丙胺后,条件性位置偏爱效应明显,且出现明显刻板行为。2、甲基苯丙胺依赖+H1/PIL2一周组和四周组两个亚组条件性位置偏爱实验,伴药盒停留时间均比单纯依赖组明显缩短(P<0.05),八周组则无明显改变。3、甲基苯丙胺依赖+H1/PIL2组一周组、四周组和八周组三个亚组大鼠刻板行为评分与单纯依赖组比较均显著减少(P<0.05)。4、甲基苯丙胺依赖+H1/PIL2组,大鼠黑质、纹状体、伏隔核三个脑区人白细胞介素2含量与单纯依赖组比较明显升高(P<0.05)；中脑腹侧被盖、额叶皮质人白细胞介素2含量与单纯依赖组比较无显著改变(P>0.05)。海马人白细胞介素2的含量与单纯依赖组相比较显著降低(P<0.05)5、甲基苯丙胺依赖+H1/PIL2组,伏隔核内的多巴胺含量与单纯依赖组比较显著升高(P<0.05)。结论：1、采用多次腹腔注射甲基苯丙胺,结合CPP实验及刻板行为评分的方法成功建立甲基苯丙胺依赖大鼠模型。2、甲基苯丙胺依赖+H1/PIL2组,MA依赖大鼠精神依赖症状减轻,刻板行为改善。3、侧脑室注射H1/PIL2-周组的IL2含量表达在黑质、伏隔核、纹状体三个脑区显著增高,在中脑腹侧被盖、额叶皮质人白细胞介素2含量无显著改变,在海马人白细胞介素2含量显著减少。4、侧脑室给药后,一周组和四周组伏隔核多巴胺含量明显增加,提示白细胞介素2可能不是通过甲基苯丙胺诱导的伏隔核多巴胺神经通路发挥对甲基苯丙胺依赖的戒断作用,而是通过作用于伏隔核内的其他神经递质发挥戒断作用。