引言:　　 系统性红斑狼疮(systemiclupuserythematosus，SLE)是自身免疫性疾病的原型，以体内产生多种致病性抗体、累及多系统、多脏器为临床特征。该病在中国的患病率在36.03-84.43/10万之间，好发于育龄期妇女，男女患病率之比约为1∶9，其发病机制迄今尚未完全阐明，目前认为与遗传、性激素、感染、环境等因素相互作用引起机体免疫调节紊乱相关。狼疮肾炎(lupusnephritis，LN)是SLE常见的临床表现，是影响SLE预后的重要因素之一。近50％的SLE患者在病程早期即出现尿检异常或肾功能异常，80％患者在以后的病程中出现明显的肾功能异常[1]。10％-20％的LN患者最终发展成终末期肾脏病[2-4]。由于狼疮肾炎的临床表现及预后在不同种族、不同地区存在差异，甚至同一种族不同群体之间也存在差异，这种异质性可能与多种因素相关。因此确定本民族、本地区狼疮肾炎的临床特点，了解影响预后的因素是十分必要的。我们收集河南汉族狼疮肾炎的临床资料分析其临床特征，并进行长期随访，了解影响其生存的因素，以便更好指导临床，使更多的患者受益。　　 从遗传学角度上讲，系统性红斑狼疮又是一个多基因病，单核苷酸多态性（singlenucleotidepolymorphisms，SNPs）和拷贝数变异(copynumbervariants，CNVs)是人类基因变异的两个重要遗传基础。近几年对SLE的基因关联分析研究(genome-wideassociationstudy，GWAS)发现了许多新的易感基因/位点。但是SNPs对于SLE这一复杂性状疾病来讲，仅能解释相对一小部分疾病风险，即使再扩大样本量，遗传因素如何导致疾病的发病仍然解释不清。在SNP-GWAS的热潮过后，如何进一步挖掘SNP芯片数据的剩余价值是许多研究机构关心的问题，CNV成为研究热点，基于SNP的全基因组关联研究结果，选择具有遗传风险性的基因进行CNV的研究，发现补体C4(complementcomponent4)、FCGR3B(FcgammareceptorⅢBgene)、TLR7(toll-likereceptor7)、CCL3L1(CCchemokineligand3-like-1)等基因拷贝数变异与系统性红斑狼疮发病相关，但这些研究大都来自其他种族。目前有关趋化因子CCL3L1与SLE相关性研究结果存在较大差异，并且不同群体之间基因拷贝数分布也存在差异，中国人群CCL3L1拷贝数的分布及是否与SLE相关尚未见报道。　　 因此，本研究在分析河南汉族狼疮肾炎流行病学、临床病理资料及预后因素的同时，应用多重基因拷贝数检测的生物学技术分析了患者的遗传信息，探索CCL3L1基因拷贝数变异与河南汉族狼疮肾炎及其临床表型是否存在相关性，为进一步阐明系统性红斑狼疮的遗传发病机制提供理论基础。　　 目的:　　 1.分析河南汉族狼疮肾炎临床病理特点、生存率及预后因素。　　 2.了解CCL3L1基因拷贝数在河南狼疮肾炎及正常人群分布情况;探索CCL3L1基因拷贝数变异与河南狼疮肾炎及其临床表型是否存在相关性。　　 方法:　　 1研究对象　　 1.1研究对象来自2003年1月～2010年12月间就诊于郑州大学第一附属医院肾病风湿科的狼疮肾炎患者491例，其中男性52例，女性439例，均符合1997年ACR系统性红斑狼疮分类标准，采集人口学资料、临床及病理资料，每3-6月进行一次随访，终点事件定义为死亡。其中血液标本保存完好的LN患者共337例，女性307例，男性30例。　　 1.2健康对照者来自郑州大学学生志愿者及郑州大学第一附属医院体检中心的健康志愿者，共338例，其中女性309例，男性29例，采集血样标本。年龄性别均与狼疮肾炎组匹配，所有入选者均来自河南汉族。　　 2实验方法　　 2.1对所有临床病理资料进行总结，建立excel表格，每3-6个月门诊或者电话随诊1次，或按病情随诊，终点事件为死亡。记录患者主要的临床表现、病情变化、实验室检查、治疗方案、并发症及死亡原因。　　 2.2用酚-氯仿法提取外周血基因组DNA，采用上海天昊生物科技有限公司开发的AccuCopyTM多重基因拷贝数检测专利技术，进行病例-对照分析，确定狼疮肾炎和健康对照CCL3L1基因拷贝数变异分布情况及CCL3L1拷贝数变异对狼疮肾炎所贡献的风险大小。　　 2.3采用病例-病例对照研究，进一步探索CCL3L1基因拷贝数变异是否与狼疮临床表型具有相关性。　　 3统计分析　　 采用SPSS17.0统计软件包进行实验数据的统计分析，定量资料以均数±标准差表示，定性资料以频数（百分比）表示;计量资料满足正态分布用t-test，偏态分布用Mann-WhitneyTest。定性资料采用卡方检验和Fisher精确概率法进行组间比较;采用Logistic回归分析狼疮肾炎的风险因素;采用Kaplan-Meier方法估计患者的生存率曲线和生存时间的95％可信区间(CI)，用Log-rank检验比较各组生存率差异。多因素分析用Cox比例风险回归模型进行分析，以确定影响生存率的独立风险因素。P＜0.05被认为有统计学意义。　　 结果:　　 1.河南汉族狼疮肾炎肾脏病理类型分布特征:增殖性病理类型占比例较大，Ⅳ型最多，共164例(33.4％)，Ⅲ型82例(16.7％)，复合型Ⅲ+Ⅴ型39例(7.9％)、Ⅳ+Ⅴ型83例(16.9％)，非增殖性狼疮肾炎占比例相对较少，Ⅰ型9例(1.8％)，Ⅱ型46(9.4％)，Ⅴ型67例(13.6％)，Ⅵ型最少，仅有1例(0.2％)。　　 2.生存分析:河南汉族狼疮肾炎患者1年生存率98.0％，5年生存率88.0％，10年生存率77.0％，15年生存率53.0％，20年生存率45.0％，中位生存时间为17.3年。　　 3.COX回归分析:升高的血清肌酐(HR，2.041;95％CI，1.134-3.672)和大量蛋白尿(HR，1.716;95％CI，1.104-2.666)是影响生存的独立风险因素，服用羟氯喹(HR，0.197;95％CI，0.047-0.820)和糖皮质激素(HR，0.457;95％CI，0.252-0.828)是独立的保护因素，而其他的临床指标对生存的影响无统计学意义。　　 4.死亡原因分析示:死亡47例，18例(38.3％)死于感染，11例(23.4％)死于SLE疾病本身，14例(29.8％)死于心血管疾病，4例(8.5％)死于其他原因。感染是死亡的主要原因，与疾病相关的死亡多见于发病的前5年，而心血管事件相关的死亡多见于病程大于5年的患者，差异有统计学意义。　　 5.河南汉族人群CCL3L1基因拷贝数的中位数为4，狼疮肾炎组的高拷贝数比健康对照组发生率高，差异具有统计学意义(P＜0.05)。　　 6.CCL3L1拷贝数变异对狼疮肾炎风险分析:低拷贝数是狼疮肾炎的保护性因素(RR=0.685，P=0.018)，高拷贝数是风险因素(RR=1.392;P=0.039)，但多因素回归分析提示仅低拷贝数是独立的保护因素(RR=0.644:P=0.013)。　　 7.CCL3L1拷贝数变异与狼疮肾炎临床表型的相关性分析:CCL3L1高拷贝数可以明显增加抗ds-DNA抗体的阳性率(RR=1.794;P=0.033)、尿蛋白的含量(RR=1.629;P=0.009)、肾脏病理活动指数(RR=1.140;P=0.025)的风险。　　 结论:　　 1.河南汉族狼疮肾炎长期生存率较其他种族低。　　 2.大量蛋白尿及肾功能降低是影响生存的独立风险因素，长期服用激素及羟氯喹、防止心血管的并发症可能改善狼疮肾炎的生存率。　　 3.河南狼疮肾炎低拷贝数是独立的保护性因素;高拷贝数可以增加抗ds-DNA抗体的阳性发生率、尿蛋白含量以及肾脏病理高活动指数的风险。