近年来的研究表明，氨基酸不仅是蛋白质合成的底物，而且可以调控蛋白质的合成。最近体外试验验证Met、Thr、Ile和Leu可以影响酪蛋白的合成速率，且Ile和Leu对mTOR磷酸化具有促进作用。本文研究在奶牛机体复杂的环境下，添加这4种EAA对乳蛋白合成的影响机制。　　本试验选用10头牛，按照5×5重复拉丁方设计，日粮蛋白水平为16%和12.7%，低蛋白日粮添加过瘤胃氨基酸，氨基酸添加量分别为 0、Met(5g/d)、Met+Thr(16.1g/d)和Met+Thr+ Ile(18g/d) +Leu (30.9g/d)。观察对乳蛋白产量、血浆AA浓度变化、激素浓度和乳腺信号通路的影响情况。　　试验结果表明：高蛋白组和低+MTIL 组的产奶量显著高于其他组，而且低+M 组和低+MT组的产奶量显著高于低蛋白组（P<0.01）。乳蛋白率、乳脂率和乳糖率不受试验处理的影响。在乳蛋白产量方面，高蛋白组显著高于低蛋白组、低+M和低+MT 组（P<0.01），并且低+M和低+MTIL 组的乳蛋白产量在数值上分别增加了 85.59g和71.63g。高蛋白组的乳糖产量显著高于其他四个低蛋白组（P<0.01）。高蛋白日粮处理组MUN显著高于其他处理组（P<0.01）。高蛋白组的DM、OM和CP摄入量显著高于其他四个试验组（P<0.01）。高蛋白组的DM和OM表观消化率在数值上高于其他低蛋白组。试验处理对日粮 CP （P=0.25）、NDF （P=0.41）和 ADF（P=0.65）的表观消化率影响不显著。高蛋白组摄入-N显著高于其他组（P<0.01），而且乳-N、尿氮、粪氮及总氮排出量显著高于其他组（P<0.01)。高蛋白组的泌乳氮效率显著低于其他组（P<0.01），尿氮占摄入-N的比例显著高于其他组（P<0.01），粪氮及总排出氮占摄入氮的比例不受日粮处理的影响（P=0.42）。高蛋白组和低+MTIL组的血浆中尿素氮显著高于低蛋白、低+M和低+MT三组（P<0.01）。高蛋白组的Met显著低于其他组的Met浓度，而高蛋白组的Val浓度显著低于其他组的Val浓度。高蛋白组和低+MTIL组的Leu、Arg 高于其他处理组。Thr、His和Phe 的血浆浓度不受试验处理的影响。高蛋白和低+MTIL组的血浆尿素浓度显著高于其他处理组。胰岛素、胰高血糖素和生长激素浓度不受试验处理的影响。低蛋白日粮的IGF-I浓度显著高于其他处理组（P＜0.05）。低+MT组的催乳素的浓度显著高于低蛋白和MTIL组的催乳素浓度（P＜0.05）。低蛋白组和低+MTIL组4EBP1的mRNA表达量显著高于M组和MT组。低+MTIL组的mTOR蛋白表达量显著高于高蛋白和M组的表达量。低+MT组的S6K1的表达量显著低于高蛋白，低蛋白和低+MTIL组的表达量。与高蛋白组和低+MTIL组相比，低蛋白组、低+M和低+MT组的4EBP1磷酸化程度显著降低了（P<0.01）。高蛋白组的eEF2磷酸化程度要显著低于添加AA的三个组（0.01