论文部分内容阅读
肝癌目前已经成为我国最普遍的癌症之一,并且在男性的癌症死亡中占比最高,是危害我国人民健康的重要疾病。肝癌的早期诊断对于提升后期的治疗效果以及提高患者的生存率都具有重要作用。作为一种新兴的医学成像技术,核磁共振成像（MRI）具有诊断符合率高、无创伤等诸多优点,非常适合用于肝癌的临床诊断。但对于直径小于1cm的肿瘤组织,MRI存在着病灶部位与正常组织信号区别不明显的问题,需要使用对比剂提升病灶部位与正常组织的信号差异。超顺磁性纳米氧化铁颗粒（SPION）作为MRI的T2对比剂,具有良好的生物相容性、较低的毒性、较高的弛豫率以及被动靶向肿瘤部位等优点,且通过对SPION的功能化修饰可以实现对肝癌的主动靶向,是一种极具发展潜力的肝癌诊断MRI对比剂。本论文制备了一种具有主动靶向及被动靶向肿瘤能力的SPION,并通过细胞实验以及动物模型实验对制备的SPION的靶向能力以及肝癌成像能力进行了评估。本论文的具体研究内容如下:（1）制备了粒径在38 nm,电位在-6 mV的由羟乙基淀粉（HES）包覆的亲水性SPION,动态光散射测量结果显示制备的SPION粒径分布窄,在水中分布均匀;溶解度及稳定性试验显示制备的SPION具有很高的溶解度且能够较长时间内保持稳定。合成并分离纯化了酸性响应多肽pHLIP的N端及C端链接在聚乳酸上形成的两种聚赖氨酸聚合物PDL-（PEG）24-ACP（N端链接）以及pHLIPx-（PEG）24-PDL（C端链接）,使用紫外以及荧光光谱对聚合物的结构进行了确认;使用圆二色光谱验证了聚合物上的靶向多肽的pH响应能力。运用合成的聚合物成功地对SPION进行了组装获得了SPION纳米簇,DLS结果显示通过控制聚合物的量可以精准控制所得的SPION纳米簇的粒径,TEM结果显示组装得到的SPION纳米簇在水中分布均匀、粒径分布窄、形貌完整,稳定性试验证明组装的SPION纳米簇具有良好的胶体稳定性。（2）通过细胞实验考察了制备的SPION纳米簇的酸性环境响应能力,结果显示带有酸性响应多肽的SPION纳米簇在弱酸性条件下有着更多的细胞摄取,即具有良好的pH响应能力,PDL-（PEG）24-ACP组装的SPION纳米簇拥有更好的pH响应功能。（3）考察了SPION及其纳米簇溶液的横向弛豫率,结果显示制备的亲水性的HES-SPION的弛豫率为55.367 mM-1·s-1,弛豫率与SPION的粒径程正相关关系;使用手术移植法建立了小鼠原位肝癌模型,之后采用组织观察法以及切片观察法验证了原位肝癌的成功建立;使用制备SPION纳米簇进行小鼠原位肝癌的MRI成像,结果显示不同的SPION纳米簇都具有一定的背景T2造影效果,而只有pH响应的SPION纳米簇具备肿瘤动态MRI成像的能力,这对于准确诊断直径<1cm的肝癌肿瘤有着潜在实际应用价值。