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目的:精氨酸血管加压素(arginine vasopressin,AVP),是一种由下丘脑的视上核和室旁核所分泌的9肽激素,其拥有着广泛的生理病理作用,并参与多种疾病的发生发展。AVP现已作为一种强力的血管收缩剂应用于出血性休克、心脏骤停等急救中,其拮抗剂药物也已应用于心衰伴低钠血症的治疗中。但AVP对心血管系统的作用仍未完全明了,如长期AVP升高会导致心肌肥厚、心律失常增加,但其中的具体机制还鲜有报道。T型钙电流所导致的病理作用以及T型钙电流增强所出现的时机,与AVP的心血管作用和升高时机高度相符。因此T型钙通道很可能是AVP长期心脏作用的重要媒介。本研究使用全细胞膜片钳技术对AVP对新生大鼠心肌细胞的T型钙通道的作用进行初步探究,并以此探讨AVP对T型钙通道的影响以及T型钙通道在AVP的心脏作用中的可能影响。方法:1新生大鼠心室肌细胞制备与细胞培养实验中使用1-3内的新生SD大鼠制备原代新生乳鼠心肌细胞,经酶解法分离。心肌细胞于出现自发搏动后24内使用,或依照实验设计药物刺激处理后使用。2电生理实验设计实验中记录全细胞膜片钳的电极内液(mmol/L)为:CsCl 130,,EGTA10,Mg-ATP 2,HEPES 25(Cs-OH调节p H为7.3),电极外液为氯化四乙铵(TEA)-Cl 136,CaCl2 2,MgCl2 2,HEPES 25,葡萄糖20(TEA-OH调节pH为7.3)。室温条件为(20℃-23℃),玻璃微电极注入电极内液后阻抗达2-5MΩ。L型+T型钙电流的测定设计为,维持电位为-100mV,测试电位为-90mV至+50mV,阶跃电压10mV,步宽300ms。L型钙电流的测定设计为,维持电位为-50mV,测试电位为-40mV至+50mV,阶跃电压10mV,步宽300ms。急性作用测定时,采用同一细胞药物刺激前后自身对照的方法,记录未加入药物时的钙电流作为正常对照组,随后加入相应剂量的AVP,5分钟后再次记录钙电流记录作为实验组。慢性作用测定,同批次原代细胞分为对照组、短期组、长期组,长期组使用AVP(300nM)处理48小时,短期组处理24小时,对照组不做处理。结果:1急性作用,使用300nM AVP处理细胞,增幅为(28.51±3.70)%(n=4,P=0.023),电流峰值电压仍位于-30mV,无明显改变。而使用1000nM时,T型钙电流峰值电流密度增加幅度为(45.1±14.8)%(n=6,P=0.016),且出现电流-电压曲线左移。经Boltzmann方程进行激活曲线拟合,半数激活电位由-44.36mV,转变至-50.81mV(拟合度R2因子分别为0.9897,0.9982)。2慢性作用,使用300nM AVP对心肌细胞进行慢性处理后T型钙电流增强。正常对照组T型钙电流电流密度为-2.43±0.19(n=14);短期组T型钙电流为3.06±0.19(n=17);长期组T型钙电流为-3.42±0.23(n=13),P=0.006。较对照组,短期组增加幅度为25.9%,长期组增加幅度40.7%。进一步的多重比较分析表明,短期组与对照组、长期组与对照组间均有统计学差异,分别为P=0.035,P=0.02;但短期组与长期组无统计学差异,P=0.216。与急性作用相似,在300nM AVP浓度下,激活电压没有明显移动。结论:在急性和慢性作用时,AVP均可增强T型钙电流。而T型钙电流能够导致促使心肌细胞肥大、致心律失常等作用。因此T型钙通道很可能是AVP心脏作用重要媒介。