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目的:研究狼毒大戟乙醇提取物联合吉西他滨对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、凋亡及周期的作用。材料与方法:1.将人三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231作为研究对象。2.用CCK-8法检测狼毒大戟乙醇提取物1μg/m L、μg/m L5、10μg/m L、20μg/m L、40μg/m L、60μg/m L、80μg/m L、60μg/m L1对乳腺癌细胞MDA-MB-231的作用,并计算抑制率及IC50。用CCK-8法检测吉西他滨0.25μg/m L、0.5μg/m L、1μg/m L、2μg/m L、4μg/m L、8μg/m L对乳腺癌细胞MDA-MB-231的作用,并计算抑制率及IC50。用CCK-8法检测狼毒大戟乙醇提取物1μg/m L、5μg/m L、10μg/m L、20μg/m L、40μg/m L、80μg/m L、160μg/m L对正常人乳腺细胞MCF-10A是否具有细胞毒性,得出无细胞毒性浓度。用CCK-8法检测无细胞毒性浓度的狼毒大戟乙醇提取物分别联合0.25μg/m L、0.5μg/m L、1μg/m L、2μg/m L、4μg/m L、8μg/m L浓度的吉西他滨48h后,对乳腺癌细胞MDA-MB-231的作用,并计算抑制率及IC50。3.流式检测术检测狼毒大戟乙醇提取物无细胞毒性浓度与48h吉西他滨IC50浓度单独应用或联合应用对乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞周期及细胞凋亡的作用。结果:1.狼毒大戟乙醇提取物单独作用于人乳腺癌细胞MDA-MB-231,24h、48h的IC50值分别为50.389μg/m L、31.027μg/m L;吉西他滨单独作用于人乳腺癌细胞MDA-MB-231,24h、48h的IC50值分别为2.231μg/m L、1.434μg/m L;狼毒大戟乙醇提取物单独作用于正常人乳腺细胞MCF-10A,1μg/m L、5μg/m L浓度无明显细胞毒性;狼毒大戟乙醇提取物1μg/m L、5μg/m L分别联合吉西他滨作用于人乳腺癌细胞MDA-MB-231,48h的IC50值分别为1.135μg/m L、0.769μg/m L。2.狼毒大戟乙醇提取物1μg/m L和5μg/m L、吉西他滨1.4μg/m L、狼毒大戟乙醇提取物1μg/m L、5μg/m L分别联合吉西他滨48h的IC50 1.4μg/m L作用于人乳腺癌细胞MDA-MB-231,48h后联合组细胞周期周期阻滞效果优于吉西他滨组,狼毒大戟乙醇提取物能够增强吉西他滨的周期阻滞能力。3.狼毒大戟乙醇提取物1μg/m L、5μg/m L分别联合吉西他滨48h的IC50 1.4μg/m L,均能促进人乳腺癌细胞MDA-MB-231的凋亡,随着药物浓度的增加,狼毒大戟乙醇提取物联合吉西他滨作用于人乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞的细胞凋亡率也明显增加。结论:1.狼毒大戟乙醇提取物与吉西他滨单独应用均能抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖。并在一定范围内具有与时间和浓度呈正相关的特点,即随着时间的延长及药物浓度的增加,增殖抑制的效果增强。当狼毒大戟乙醇提取物与吉西他滨联合使用时,两药具有协同效应,对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖抑制作用明显增强且优于两药单独作用。2.狼毒大戟乙醇提取物与吉西他滨作用于人乳腺癌细胞MDA-MB-231 48h后,狼毒大戟乙醇提取物1μg/m L、5μg/m L均能够增强吉西他滨对细胞周期的阻滞效果,且其阻滞效果与浓度呈正相关。3.狼毒大戟乙醇提取物与吉西他滨单独作用于人乳腺癌细胞MDA-MB-231 48h后,与对照组相比,细胞的凋亡率皆明显上升。当狼毒大戟乙醇提取物联合吉西他滨作用于人乳腺癌细胞MDA-MB-231 48h后时,与对照组相比,细胞凋亡率显著提升,且两者具有协同作用,高于单药作用。