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SARS (Severe Acute Respiratory Syndrome)是一种传染性强、病死率高、严重危害人民生命健康的传染病。世界卫生组织于2003年4月6日宣布引起SARS的病原体是一种新的病毒,属于冠状病毒家族,称为SARS相关冠状病毒(SAPS-Associated coronavirus, SARS-CoV)。SARS-CoV表现出许多不同于冠状病毒的特性,为冠状病毒中一个新的分支。目前,病毒性疾病尚无特效治疗方法,对于SARS也是一样。所以,控制SARS的最好办法是预防,而疫苗的开发则是建立有效防范措施的关键环节。DNA疫苗是继病原体疫苗、亚单位疫苗之后的第三代疫苗,具有许多的优越性。所以本研究选择了SARS病毒DNA疫苗这一方向,以SARS-CoV主要结构蛋白之一——M蛋白基因作为研究对象。构建针对SARS-CoVM蛋白基因的重组核酸疫苗,观察其免疫小鼠后机体的特异性免疫应答的情况,探讨其作为抗SARS-CoV疫苗的可能性。 本研究由两部分组成: 第一部分为 SARS-CoV M蛋白基因重组核酸疫苗的构建。从GenBank上获取SARS病毒株SIN2774的M蛋白基因序列,使用引物设计软件Primer Premier 5.0进行引物设计,从中选择最佳引物,并在引物5’端分别添加真核表达质粒pcDNA3.1(+)多克隆位点中所包含的EcoRⅠ和Xho Ⅰ酶切位点及保护碱基,以从新加坡获得的SIN2774 cDNA为模