目的：黄曲霉毒素G1（Aflatoxin G1，AFG1）是具有致癌性的真菌毒素，可通过细胞色素P450（CYP450）代谢活化，诱导靶细胞DNA氧化损伤，进而参与细胞癌变。有报道AFG1可诱导肺组织慢性炎症反应，促进CYP450亚型CYP2A13表达；体外联合给予AFG1和TNF-α作用于具有人Ⅱ型肺泡上皮细胞（AT-Ⅱ）特性的A549细胞，模拟AFG1诱导的炎症微环境，明显促进 AFG1致 A549细胞 DNA氧化损伤，并上调CYP2A13的表达。提示AFG1诱导的炎症反应可能通过影响CYP2A13活性而介导AFG1的活化激活。有研究显示，AFG1致DNA氧化损伤可诱导A549细胞凋亡。　　我们最近研究发现AFG1可以诱导TNF-α介导的炎症反应。本研究旨在探讨TNF-α是否通过上调CYP2A13而促进AFG1在AT-Ⅱ细胞的活化、加剧细胞DNA氧化损伤和凋亡。　　方法：　　在整体水平上，收集本实验室前期AFG1、TNF-α阻断剂+AFG1及对照组处理的小鼠肺组织，采用免疫组织化学和Western blot方法检测CYP2A13的表达。其次，在细胞水平上，采用siRNA敲低A549细胞2A13或NF-κB的表达，分别给予4 mg/L AFG1、4 mg/L AFG1+20 mg/L TNF-α、PBS处理细胞，采用流式细胞术（FCM）检测A549细胞ROS生成和细胞凋亡；Western blot检测 CYP2A13和 DNA损伤标志物 γ-H2AX的表达；免疫细胞染色方法观察DNA损伤标志物γ-H2AX和8-OHdG的表达，研究CYP2A13和NF-κB通路在TNF-α影响AFG1致细胞损伤中的作用。　　结果：　　1. 免疫组织化学和Western blot结果表明，TNF-α阻断剂+AFG1组肺组织CYP2A13阳性表达的细胞数目和蛋白含量明显低于AFG1组，提示TNF-α阻断剂可抑制CYP2A13的表达。　　2. FCM和Western blot结果显示，4 mg/L AFG1处理可明显促进体外培养A549细胞ROS生成和增加DNA损伤标志物γ-H2AX的表达。使用siRNA敲低A549细胞CYP2A13表达，AFG1对A549细胞ROS生成及γ-H2AX表达的促进作用没有明显改变。　　3. FCM结果表明，AFG1+TNF-α组A549细胞ROS含量明显高于对照组和AFG1组，采用siRNA敲低CYP2A13，可降低AFG1+TNF-α对ROS的上调作用。　　Western blot和免疫细胞染色结果显示，AFG1+TNF-α处理组A549细胞γ-H2AX和8-OHdG表达均高于未加药组；采用siRNA敲低A549细胞CYP2A13后，AFG1+TNF-α处理组A549细胞γ-H2AX和8-OHdG的表达明显低于未敲低CYP2A13的AFG1+TNF-α处理组细胞。　　结果提示TNF-α通过上调CYP2A13表达而促进AFG1致DNA氧化损伤作用。　　4. 采用 NF-κB siRNA敲低 A549细胞 NF-κB，与 NC siRNA组相比，FCM结果显示，AFG1处理组ROS生成情况无明显变化，AFG1+TNF-α处理组 ROS生成明显降低；Western blot结果显示，NF-κB siRNA+ AFG1+ TNF-α处理组细胞 CYP2A13和 γ-H2AX表达低于 NC siRNA+AFG1+TNF-α处理组细胞。结果提示TNF-α通过NF-κB通路上调A549细胞中2A13的表达，进而加剧AFG1诱导的DNA氧化损伤。　　5. 用AFG1和TNF-α联合处理的A549细胞的凋亡率高于单独用AFG1处理的细胞；通过siRNA阻断CYP2A13或NF-κB信号通路，明显抑制了AFG1和TNF-α联合处理组的细胞凋亡率。　　结论：TNF-α可能通过NF-κB通路上调CYP2A13，促进AFG1在AT-Ⅱ细胞中代谢激活，进而增强AFG1致细胞DNA损伤和凋亡作用。