沉香叶化学成分及其生物学功效研究

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沉香来源于瑞香科植物白木香Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg及沉香A。agallocha Roxb含有树脂的木材,为较常用的中药,其味辛、苦,性微温,具行气止痛、温中止呕、纳气平喘的功效,用治胸腹胀闷疼痛、胃寒呕吐呃逆、肾虚气逆喘急。白木香树叶由嫩到老都可深加工为沉香茶,树皮纤维发达,是造纸和人造棉的好原料;种子富含油脂,有重要的工业用途。本文通过系统预试法,检测了沉香叶中的各化学成分(主要为有机化学成分),并对其进行了体外抗氧化与抗肿瘤活性研究。主要研究结果如下:  化学成分鉴定与提取:经过系统预试法得出,沉香叶中可能含有氨基酸、多糖、皂苷、生物碱、黄酮、有机酸、强心苷以及挥发油等化学成分。对沉香叶中的黄酮、多糖、皂苷、生物碱及脂质类化学成分分别进行提取。  抗氧化活性研究:用不同的抗氧化测定方法评价沉香叶各提取物的抗氧化活性。当浓度为10mg/mL时,各提取物对DPPH·的清除率大小依次为:Vc(89.96%)>黄酮(89.67%)>生物碱(61.20%)>皂苷(50.96%)>多糖(32.80%)>脂质(27.74%);当浓度为10mg/mL时,各提取物对O2·-的清除率大小依次为:生物碱(98.11%)>多糖(81.15%)>黄酮(79.34%)>皂苷(45.82%)>脂质(20.70%);当浓度为25mg/mL时,各提取物对卵黄脂蛋白过氧化的抑制能力大小依次为:黄酮(108.80%)>皂苷(105.56%)>生物碱(72.92%)>多糖(71.06%)>Vc(68.98%)>脂质(31.02%);当浓度为5mg/mL时,各提取物的还原能力大小依次为:Vc(2.76)>黄酮(0.36)>皂苷(0.25)>多糖(0.17)>脂质(0.063)>生物碱(0.061);当浓度为2.5mg/mL时,各提取物对·OH的抑制能力大小依次为:粗提物(348.07U/mg/mL)>Vc(315.74U/mg/mL)>生物碱(295.33U/mg/mL)>黄酮(288.17U/mg/mL)>多糖(283.55U/mg/mL)>皂苷(94.02U/mg/mL)>脂质(49.02U/mg/mL);当浓度为5mg/mL时,各提取物的总抗氧化能力大小依次为:Vc(1090.58U/mg/mL)>粗体物(172.56U/mg/mL)>皂苷(168.66U/mg/mL)>黄酮(126.11U/mg/mL)>多糖(38.23U/mg/mL)>脂质(21.58U/mg/mL)>生物碱(2.16U/mg/mL)。分析认为:沉香叶粗提物、黄酮、皂苷、生物碱、多糖具有较好的抗氧化活性,在实验浓度范围内,随药物浓度增加,抗氧化能力增强,且粗提物、黄酮在所有抗氧化检测方法中的活性表现最为稳定。此外,不同沉香叶制品醇提物的DPPH·清除活性不同,沉香茶的DPPH·清除率最高达90.07%,远高于沉香叶其他制品的DPPH·清除率。  抗肿瘤活性研究:沉香叶各提取物均有一定的抗肿瘤细胞活性。2.5mg/mL各沉香叶提取物处理癌细胞48h,MTT法研究结果发现,提取物对Hela细胞的抑制率大小依次为:粗提物(84.16%)>黄酮(75.02%)>CTX(65.41%)>生物碱(58.86%)>多糖(19.01%)>皂苷(11.05%);对A549细胞的抑制率大小依次为:黄酮(94.05%)>粗提物(92.72%)>皂苷(27.65%)>生物碱(15.21%)>CTX(10.09%)。在同等条件下,倒置显微镜与荧光显微镜观察两种细胞的形态发现,药物处理组细胞贴壁性降低,细胞形态改变,荧光显微镜下发现核质固缩或断裂成碎片边缘化,荧光染色加强,细胞膜破损,出现凋亡小体等。在细胞周期与凋亡检测中,处理组细胞在S期、G2/M期的比例减少,大部分细胞停留在G0/G1期,细胞不能进入分裂期,随着时间的延长,逐渐引起细胞凋亡,并且在两种细胞中都可以观察到由生物碱、黄酮引起的明显的DNA亚二倍体峰(即细胞凋亡峰)。结论:各沉香叶提取物抗肿瘤细胞效果不同,黄酮效果最好,其可能是沉香叶中主要的抗肿瘤活性成分。  结论认为:沉香叶多种提取物具有一定的抗氧化与抗肿瘤活性,沉香叶中的黄酮类物质可能是其发挥抗肿瘤与抗氧化作用的主要化学成分,并且黄酮类的抗肿瘤作用可能与其抗氧化作用有关。
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