金银花是非常常用的传统中药材,历年版的《中华人民共和国药典》一部中都有收载,具有清热解毒,疏散风热的功效。作为传统复方中药的主要组成部分,广泛应用于中医临床配伍组方治疗多种疾患,是众多中成药和保健药品的原料药材,也是广泛使用的食品资源。近年来,随着金银花与山银花价格差异较大,市场上相当一部分产品是以山银花入药,导致金银花及含金银花的产品中掺假严重。这两种草药外观形态和化学成分不同,中药特性和适应症有相似之处,但山银花中含有的较高含量的皂苷类成分能造成其在应用时存在诸多安全隐患,目前仅以绿原酸和木犀草苷作为质控指标,难以真正反映金银花质量的优劣。因此,针对目前金银花掺假严重且传统检测方法耗时耗溶剂,使得它们不适合在工业生产中快速分析的问题,有必要建立一种具有快速鉴别,且能同时测定多指标成分含量和检测指纹图谱的低成本分析方法,来解决金银花药材及其复方中药的质量控制问题。本课题采用超高效液相色谱法(UHPLC-DAD/ELSD)建立了一套用于金银花药材质量控制的定性定量分析方法,可在8 min内通过出峰的皂苷类成分鉴别金银花中是否掺有山银花,并且可以同时鉴别出金银花提取物中是否含有山银花;在同一色谱条件下,可以同时测定金银花与山银花中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木犀草苷、异绿原酸A、B、C等7种共有成分的含量,以及山银花中灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙2种特有成分的含量。此外,UHPLC作为全面评价中药材质量的方法,也实现了金银花多指标成分含量的同时测定和指纹图谱的同时检测。通过方法学考察,研究的9种成分线性关系良好,精密度、稳定性、重复性、回收率的RSD值均小于3%,平均加样回收率为98.71%~101.1%,说明本分析方法准确可靠。与传统方法比较,本分析方法同时具有分析时间短、分离效果好、消耗溶剂少、进样量少、操作简便等优点。采用本分析方法对15个批次金银花、9个批次山银花以及6个批次金银花提取物进行了比较分析研究,其分析结果能有效、快速和全面的评价不同来源药材及提取物的质量,从而为该药材建立了一种可靠的质量分析方法,能更全面反映和有效控制金银花及其提取物的内在质量,同时也可以为其他含金银花药材的复方完善质量标准提供参考依据,也可以作为参考应用于其他药材。在单因素影响实验的基础上,以Box-Behnken中心组合实验设计原理为依据,以总酚酸提取量为指标,采用响应面法对金银花的提取工艺进行优化,主要考察乙醇浓度(45%~75%)、液料比(10~30倍)和提取时间(1~3 h)等因素的影响,优化得到的最佳条件为乙醇浓度65.07%,液料比30倍,提取时间为1 h,其中乙醇浓度对金银花中总酚酸提取率有显著影响(P<0.01)。结合后续生产实际情况确定提取条件如下:乙醇浓度65%,pH=3,液料比为1:30,提取2次,每次1 h,提取温度为90℃。