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研究发现,小分子一氧化氮（NO）在生物体内具有广泛的生理活性,参与诸多生理功能和病理生理过程。其兼有信号分子和自由基的双重性质。NO与肿瘤生长侵袭的关系也是近年来研究的热点,由于NO的双重特性决定其对于肿瘤的调控具有“两面性”一既存在抑制作用又存在促进作用。本课题通过细胞培养、动物模型等途径应用L精氨酸（L-Arg）、硝酸甘油（GTN）、氨基胍（AG）等三种调控NO生成的药物,观察对肿瘤细胞生长增殖的影响;应用GTN干预观察肿瘤细胞转移以及相关基因和表达蛋白质谱的改变。进一步探讨了NO调控肿瘤转移的机制,以及一氧化氮供体药物潜在的抗肿瘤转移功效。 一、不同一氧化氮调控药物对肿瘤细胞增殖抑制 在LLC肿瘤细胞培养体系中加入不同浓度L-Arg、GTN、AG后观察到,三种药物高浓度均抑制细胞增殖,随浓度降低抑制作用减弱,L-Arg和GTN在低浓度均产生对肿瘤增殖的促进作用。加入L-Arg和AG的细胞培养液中随药物浓度下降NO2-水平逐步升高,加入GTN的细胞培养液中NO2-水平与药物浓度正相关;观察不同药物组合对细胞增殖影响,L-Arg和AG在一定浓度出现拮抗作用,而硝酸甘油和氨基胍基本为协同作用; 二、GTN对肿瘤细胞转移相关基因和表达蛋白质谱的调控作用 根据前部试验在Hela细胞培养体系中加入较高浓度（40μg/ml）的GTN,形态学观察细胞生长受到抑制,通过基因芯片检测发现血管生成基因和转移相关基因的表达发生明显改变,而且变化趋势以下调较多;应用双向电泳技术观察到多个蛋白质点表达量有不同程度的改变,并出现新的差异表达蛋白点,运用RT-PCR和ELISA方法对基因芯片结果进一步确定,发现GTN干预后MMP-9基因表达和细胞外液蛋白表达水平均有下降,对TIMP-1无明显影响或轻微促进作用,二者比值明显改变; 三、高浓度GTN对肿瘤转移具有抑制作用并与调控MMP-9/TIMP-1表达有关通过小鼠LLC肿瘤转移模型观察到1.6g/L硝酸甘油溶液灌胃