中国青岛文昌鱼TRAIL1基因的克隆及其表达谱分析

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TRAIL 基因首先在人类发现,是TNFR超家族的重要一员。其主要功能是介导凋亡,还可能参与骨髓系细胞的分化发育以及参与调节人类消化道上皮细胞的分化。本论文首次分析了文昌鱼TNF超家族的情况并且克隆到一个与哺乳动物TRAIL基因有高度同源性的TNF家族成员——命名为Bbt-TRAIL1,这对探讨文昌鱼免疫系统状态以及推测现代脊椎动物免疫系统的起源有着重要的作用。 文昌鱼基因组编码了多达10个TRAIL-like基因序列,本研究成功地克隆了其中1个基因的cDNA序列,表明这个TRAIL1至少在mRNA水平上是真实表达的基因。进一步的物种间分子进化分析显示Bbt-TRAIL1在进化过程中功能非常保守。 通过Southern blot研究了该基因的拷贝数,表明克隆得到的Bbt-TRAIL1在文昌鱼基因组中以多拷贝的形式存在。TRAIL1基因是首次在文昌鱼中被发现,并且是以多拷贝的形式存在,表明了这个基因受到极大的选择压力的作用。 对于Bbt-TRAIL1的转录模式,本文通过Realtime PCR做了详细分析:其mRNA表达量在整个发育阶段呈现动态的变化,在发育4h(囊胚期)和发育16h(幼虫期)的表达量有较明显上调。囊胚期是细胞分裂最旺盛的时期,在此期间,细胞凋亡起着非重重要的免疫调节功能,由此推测Bbt-TRAIL1基因参与到文昌鱼的发育过程中;幼虫期,文昌鱼的消化系统已经基本形成并且开始参与了免疫防御作用,TRAIL1 基因在此阶段高表达提示,该基因与文昌鱼的抗感染免疫过程有着必然的联系。还对文昌鱼 TRAIL1基因在不同成体组织间mRNA表达量的差异进行了比较,显示表达量基本都集中在消化道和肝盲囊中。 将发育阶段和组织分布的表达谱联系起来,我们可以推测,文昌鱼TRAIL1基因积极的参与到细胞的分裂和组织的分化过程中,其中对文昌鱼消化系统的发育可能起到至关重要的作用。
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