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目的:探讨甲状腺激素对Ras癌基因诱导小鼠肝肿瘤发生发展的影响作用。方法:1.采集3、5、7、9个月龄的非转基因和H-ras12V转基因雄鼠的肝组织和血清样本,统计肝/体质量比,并用酶联免疫法检测血清中总T3、T4水平和游离T3、T4的水平。2.提取9个月龄非转基因雄鼠肝组织(Wt)样本以及9个月龄H-ras12V转基因雄鼠肝癌组织(T)、肝癌旁组织(P),经病理确认后,提取总蛋白质和总RNA;应用蛋白质印迹法检测各组织样本中cyclin D1、p-RXRα、ERK、p-ERK的蛋白水平;RT-q PCR法检测TBG、Dio1、cyclin D1在组织样本中的m RNA水平。3.将36只SPF级3个月龄转基因雄鼠按随机数表法分为对照组、甲亢组(饲喂甲状腺片)、甲减组(饲喂丙硫氧嘧啶片),每组12只,处理4个月,7个月龄时采样,检测小鼠血清中总T3和T4水平,统计肝/体质量比、肝肿瘤大小及数量。4.将12只SPF级9个月龄H-ras12V转基因雄鼠按随机数表法分为对照组和ERK抑制组,每组各6只,采用腹腔注射给药,用ERK抑制剂PD184352处理15天,采集肝癌组织(T)和肝癌旁组织(P),提取总蛋白质和总RNA,检测抑制剂对cyclin D1和p-RXR蛋白水平的影响。结果:1.3、5、7、9个月龄的转基因雄鼠肝/体质量比随月龄的增大逐渐增高,并显著高于同月龄非转基因雄鼠(P<0.01)。酶联免疫法检测血清结果表明,与9个月龄的非转基因雄鼠相比,同月龄转基因雄鼠血清中总T3和T4水平显著升高(P<0.01),但游离T3和T4水平没有显著变化。2.RT-q PCR检测结果表明,与9个月龄的非转基因雄鼠肝组织及转基因雄鼠的肝癌旁组织相比,肝癌组织中TBG和cyclin D1的m RNA表达水平显著升高(P<0.05),Dio1的m RNA表达水平显著降低(P<0.05)。Western blot结果显示,与9个月龄的非转基因雄鼠肝组织及转基因雄鼠的肝癌旁组织相比,肝癌组织中cyclin D1、p-RXRα、ERK、p-ERK的蛋白水平均显著升高。3.甲状腺片(甲亢组)和甲硫咪唑(甲减组)处理实验结果显示,与对照组相比,甲亢组的T3和T4水平显著升高(P<0.05),甲减组的显著降低(P<0.05)。与甲减组相比,甲亢组的肝/体质量比和肝肿瘤总数都显著下降(P<0.05)。与甲减组相比,甲亢组直径>2 mm的肝肿瘤数量显著下降(P<0.05),但<2mm的肝肿瘤数量没有显著差异。4.体内抑制实验结果表明,应用PD184352抑制剂后,与对照组相比,转基因雄鼠肝癌组织中cyclin D1和p-RXRα的蛋白水平均明显降低,而肝癌旁组织中没有变化。结论:甲状腺激素对Ras癌基因诱导的肝肿瘤发展具有显著抑制作用,但对肝肿瘤发生没有显著影响。ERK信号通路可能是Ras癌基因诱导的肝肿瘤调控THs/TR信号通路的重要分子机制之一。