胃癌组织中DCC mRNA表达变化及意义

来源 :济南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hlj123456789001
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
结直肠癌缺失基因(deleted colorectal carcinoma DCC)是迄今为止发现的最长的抑癌基因,位于人类染色体18q21.3,其编码一种分子量为190 kD的跨膜磷酸化蛋白。  目的:  胃癌是常见的恶性肿瘤之一,预后较差,进展期胃癌患者术后5年生存率为20%~50%。本课题检测胃癌组织中DCC基因mRNA的表达水平,探讨其与胃癌发生、发展及临床病理特征的关系,并且为胃癌的早期诊断、治疗及预后提供参考依据。  方法:  胃癌患者52例,手术中留取胃癌组织与癌灶旁5 cm以上的正常胃组织标本。从两组标本中分别提取总RNA;应用RT-PCR两步法和目的基因片段克隆测序的方法,检测DCC基因mRNA在胃癌组织与癌旁正常组织中的表达水平。  采用SPSS20.0统计学软件。正常胃组织与胃癌组织中DCC mRNA表达阳性率比较采用Fisher确切概率法;不同临床病理类型的病人胃癌组织中DCC mRNA相对表达量比较采用t检验及方差分析。P<0.05说明差异有统计学意义。  结果:  1.基因克隆及序列测定  PCR产物经1.2%琼脂糖凝胶电泳分离,依据相对分子量的大小(215 bp)确定目的条带,回收目的基因(DNA凝胶回收试剂盒Omega公司)。将回收的目的基因与pMD19-T载体连接后,转化至感受态大肠杆菌DH5α菌中,经氨苄西林抗性及蓝白斑筛选出阳性菌落,每个PCR产物挑选5~12个白色菌落,送上海生工生物工程有限公司测序。确定PCR扩增片段为目的基因DCC及内参GAPDH。  2.DCC基因表达结果  52例癌旁组织标本中均检测到DCC基因的表达;52例胃癌组织标本中,有44例不同程度的表达DCC基因,阳性表达率为84.6%,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。以GAPDH为标准参照,检测DCC mRNA相对表达水平,胃癌组织为0.555±0.087,癌旁组织为0.796±0.095,两者比较,差异有统计学意义(P<0.01)。  3.DCC基因mRNA表达与临床、病理参数的关系  将同一例病人检测的DCC mRNA相对水平相比,即检测mRNA相对水平=(RT-PCR产物电泳带的净光密度值)/(GAPDH RT-PCR产物电泳带的净光密度值),所得数值与临床、病理参数分组进行统计学处理。可以看出,不同性别胃癌患者,两组比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同年龄的胃癌患者中,<60岁组,其DCC基因mRNA的相对表达水平是0.75±0.15,≥60岁组,其DCC基因mRNA的相对表达水平是0.84±0.09,两组比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同病变部位的胃癌组织中,DCC基因mRNA在贲门组的表达水平是0.85±0.13,在胃体组的表达水平是0.78±0.10,在胃窦组的表达水平是0.78±0.12,三组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。DCC基因mRNA在淋巴结转移阴性组中的表达水平是1.07±0.10,在淋巴结转移阳性组中的表达水平是0.59±0.08,两组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。不同TNM分期的胃癌患者中, DCC基因mRNA在I期、II期患者的表达水平是1.21±0.11,在III期、Ⅳ期患者的表达水平是0.57±0.08,两组比较,差异具有显著的统计学意义(P<0.005)。不同病理学分级、组织学分化程度胃癌患者中,DCC基因mRNA在高分化及中分化胃癌患者的表达水平是1.05±0.10,在低分化(未分化)胃癌患者的表达水平是0.58±0.05,两组比较,差异具有统计学意义( P<0.05)。  结论:  1.DCC基因在癌旁组织中均检测到阳性表达;  2.胃癌组织中DCC基因mRNA的表达水平较癌旁正常组织中明显下降;表明 DCC基因mRNA的低表达可能是胃癌发生发展的影响因素。  3.胃癌组织中DCC基因mRNA的相对表达水平与肿瘤大小、病人年龄及病变部位没有相关性。  4.胃癌组织中DCC基因mRNA的相对表达水平与淋巴结转移呈负相关,但与淋巴结转移数目无明显相关性。  5.胃癌组织中DCC基因mRNA的相对表达水平与TNM分期呈负相关,与病理学分级、组织学分化程度呈正相关。说明DCC基因mRNA在胃癌侵袭转移等过程中有一定影响,将来可能成为检验胃癌进展的肿瘤标记物之一。
其他文献
目的:探讨儿童急性淋巴细胞白血病(Acute Lymphoblastic Leukemia,ALL)患儿IgH基因克隆性重排的情况及其意义。同时探讨了两种不同的电泳方法在ALL患儿IgH基因重排研究中的差
目的观察左向右分流型先天性心脏病(简称先心病)患者血浆中的IL-17水平,以及以内皮素-1(ET-1)和一氧化氮(NO)为代表的内皮细胞功能改变,并收集各病例的相关因素临床资料,探讨
‘宝宝军团’风靡网络,掀起了一股全民理财大潮,互联网理财产品如此火爆靠的是什么?由余额宝领头的“宝宝军团”让人不得不说声佩服。与发达国家相比,我国国民的理财观念也一
我一直坚信,高三的语文复习要耐得住寂寞。世间总有太多的喧嚣繁华,不停地撩拨着学生们那本就不平和的心境。倘若深觉疲惫或是浮躁不安,又怎能摘取高考这胜利的果实。  曾经的
走过崎岖坎坷、荆棘丛生之路的共产党员陈静茂,是保康县档案局局长。在这个平凡的岗位上,他没有豪言壮语,也没有惊人的壮举,但是,他凭着对党的耿耿忠心,为发展鄂西北老苏区贫
本文以合肥某公路段膨胀土为研究对象,将不同比例风化砂掺入膨胀土,在不同基质吸力条件下进行固结排水非饱和土三轴试验,研究在不同含砂率下非饱和膨胀土强度特性.试验结果表
目的:研究微小RNA-421(miR-421)在肺癌细胞系、肺癌组织中的表达情况,预测miR-421的潜在靶基因并加以验证,探讨miR-421在肺癌细胞增殖中的作用并研究其分子机制。  方法:①常规
我是1981年初从大木厂镇调进县档案局的。改革开放二十年,我在档案局(馆)工作了18个春秋。初到档案局时,档案局刚恢复,但档案馆从59年12月成立一直在开展工作。在此之前是什么
其实,朗读是一种有声的语言艺术,它在小学语文教学中有着不容忽视的作用。朗读也是小学语文教学中最常用的方法,是提高学生语文素养的重要途径,是学生亲近文本、感受文本情感、获