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变态反应性疾病(allergic disease)是指机体被某种变应原物质致敏后,再次与类似变应原性的物质接触后所产生的异常或过强的免疫反应所导致的疾病。本文以小鼠脾细胞IgE的产牛为指标,从不同角度研究了CpG ODN的抑制作用及其可能的机制,使得对CpG ODN的认识更加全面,为临床治疗提供基础实验依据。
材料和方法:
1.取正常雌性BALB/C小鼠,制备单个小鼠脾细胞悬液或纯化B细胞悬液,在CpGODN存在或不存在情况下,用IL-4+anti-CD40刺激培养细胞,用ELISA方法检测培养上清中IgE产生的量,观察不同时间或不同浓度加入CpG ODN对小鼠脾细胞或纯化B细胞产生IgE的影响。在CpG ODN存在的情况下,用IL-4+anti-CD40刺激培养细胞,并分别加入抗IFN-γ或抗lL-12,收集培养7天的细胞上清液,用ELISA方法检测IgE产生的量,观察抗IFN-γ或抗IL-12对CpG ODN抑制IgE产生作用的影响。
2.在CpG ODN存在或不存在情况下,用或不用CFSE标记后,再用IL-4+anti-CD40刺激培养细胞,3天后收集细胞,经相应荧光抗体染色后,使用流式细胞仪进行分析,观察CpG ODN对B细胞分裂和活化的影响。
结论:
1.CpG ODN能够抑制IL-4+anti-CD40刺激小鼠脾细胞和纯化B细胞产生IgE,其抑制作用呈剂量依赖性和时间限制性。
2.抗IFN-γ和抗IL-12单克隆抗体不能完全拮抗CpG ODN对IgE产生的抑制作用。
3.CpG ODN显著促进了B细胞活化,但抑制了IL-4+anti-CD40刺激引起B细胞分裂。
4.CpG ODN抑制IgE产生的部分机制可能是通过直接作用于B细胞发挥作用,而且可能与抑制B细胞分裂有关。