【目的】胶质瘤是目前最致命的肿瘤之一,利用新的分子靶点提高当前的治疗手段是当务之急。在本次实验中,我们首先构建靶向GSK3β基因的RNAi慢病毒表达载体,为后续研究GSK3β在胶质瘤发生发展中的作用奠定基础,观察其抑制GSK3β表达后对人脑胶质瘤细胞株U87增殖、凋亡、侵袭能力的影响。【方法】遵循siRNA设计原则设计GSK3βsiRNA序列并合成其表达框架,并与载体pFU-GW-RNAi相连接,同时构建GSK3β过表达载体,共转染293T细胞,western-blot法检测转染后293T细胞中GSK3β蛋白表达,筛选出抑制效率最高的靶点序列。在体外用构建成功的靶向GSK3β的siRNA慢病毒载体导入U87细胞中,western-blot检测抑制效率,并用Transwell实验、MTT实验、流式细胞仪检测细胞生物学特性的改变。【结果】测序结果证明重组质粒构建成功,并筛选出4号靶序列对GSK3β的抑制率最高,成功构建了靶向GSK3β的siRNA慢病毒载体。将慢病毒为载体的靶向GSK3βsiRNA构建体感染U87细胞后,可以明显下调GSK3β的表达,U87细胞的侵袭能力、增殖能力以及增加U87细胞的凋亡。【结论】构建的GSK3β特异性的RNAi慢病毒表达载体可以有效的抑制GSK3β基因的表达,人脑胶质瘤细胞系U87细胞中的GSK3β表达被抑制后,对其增殖、侵袭能力有显著的抑制作用,且能增加U87细胞的凋亡。表明GSK3β在胶质瘤发生发展中起到非常重要的作用,为胶质瘤基因治疗的发展提供了新的研究思路。