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苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensi,Bt）aiiA基因表达的AHL内酯酶（AHL-Lactonase,AiiA蛋白）能有效降解革兰氏阴性细菌群体感应（quorum sensing,QS）系统中的关键信号分子N-酰基高丝氨酸内酯（N-acylhomoserine lactone,AHL）,但是苏云金芽胞杆菌表达AiiA蛋白的能力较弱。为了探究苏云金芽胞杆菌aiiA基因的转录调控机制,本课题从苏云金芽胞杆菌质粒中克隆到了aiiA基因5’端侧翼序列aP-1930--1（GenBank Accession Number:KP690195）。利用多种生物信息学软件对aiiA基因5’端侧翼序列aP-1930-1进行分析,发现侧翼序列aP-295--101、aP-295--1和aP-1930--1429是可能的启动子功能区,同时对侧翼序列aP-1930-1进行分段克隆,以GFP作为报告基因构建了苏云金芽胞杆菌aiiA基因5’端缺失片段表达载体pET28a-aP-x-GFP,利用荧光显微镜和荧光分光光度计对侧翼序列功能鉴定菌株E-coli BL21（DE3）-pET28a-aP-x-GFP的荧光强度进行定性和定量分析。结果表明侧翼序列aP-295--101、aP-295--1和aP-1930--1429可以启动报告基因GFP在大肠杆菌E.coli BL21（DE3）中表达,具有启动子功能活性。序列aP-295--101启动子功能活性强于序列aP-295--1,且序列aP-1 00--1不启动报告基因GFP在大肠杆菌E.coli BL21（DE3）中表达提示-100～-1bp区为aiiA基因启动子的负调控区；通过环状突变法,在载体pET28a-aP-295--101一GFP的基础上,对aiiA基因启动子-150-142bp处两个连续的TATA box进行突变分析,构建了单点突变菌株E.coil BL21（DE3） pET28a-aP-295--101（-144 Mu）-GFP、E.coli BL21（DE3）-pET28a-aP-295--101（-147 Mu）-GFP,双点突变菌株E.coil BL21（DE3）-pET28a-aP295--101（-144、-147 Mu）-GFP和缺失突变菌株E.coli BL21（DE3）-pET28a-aP-295--101（-162～-151 dMu）-GFP。荧光显微镜和荧光分光光度计分析发现突变菌株GFP的表达量较原始菌株E.coli BL21（DE3）-pET28a-aP-295--101-GFP均显著降低,且双点突变菌株和缺失突变菌株启动子功能下降最为显著,表明aiiA基因启动子-150-142bp处两个连续的TATA box在很大程度上影响着GFP在大肠杆菌E-coil BL21（DE3）中的表达,提示苏云金芽胞杆菌aiiA基因启动子-150-142bp处两个连续的TATA box也可能决定着aiiA基因的表达。