目的:　　复方鹿角颗粒源于上海中医药大学附属曙光医院临床经验方，治疗慢性心力衰竭(CHF)具有良好的疗效。本研究基于先进的液质联用(LC-MS/MS)分析技术，对复方鹿角颗粒有效成分进行了测定，并考察其在体内吸收、分布、代谢及排泄情况，为探寻复方鹿角颗粒药效物质基础和作用机制提供了科学依据。　　方法与结果:　　1.复方鹿角颗粒中氨基酸成分分析。　　建立复方鹿角颗粒中多种氨基酸成分的LC-MS/MS分析检测方法，在未使用衍生化方法的条件下，对复方鹿角颗粒水解后18种氨基酸成分(异亮氨酸(Ile)、盐酸赖氨酸(Lys)、苯丙氨酸(Phe)、缬氨酸(Val)、丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)、胱氨酸(Cys)、甲硫氨酸(Met)、天门冬氨酸(Asp)、精氨酸（Arg）、丙氨酸(Ala)、组氨酸(His)、谷氨酸(Glu)、色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)、甘氨酸(Gly)、脯氨酸(Pro)、亮氨酸(Leu))同时进行分析测定。10批次样品经过水解后直接进样进行含量测定，无需进行柱前、柱后衍生化或固相萃取等前处理步骤。结果表明，本方法操作简便，准确度高、选择性好。研究结果为更好的控制复方鹿角颗粒质量提供了科学依据。　　2.复方鹿角颗粒中非氨基酸类成分分析。　　建立复方鹿角颗粒中非氨基酸类化学成分的LC-MS/MS分析方法，可在13min内对香豆素（补骨脂素、异补骨脂素）、黄酮（淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、宝藿苷I、淫羊藿次苷I、橙皮苷、柚皮苷）和萜类（马钱苷、红景天苷、特女贞苷）等13种主要成分同时进行含量测定，方法快速准确。结果表明，复方鹿角颗粒中13种成分分离效果良好;通过对11个批次的复方鹿角颗粒进行分析测定，结果显示各个批次含量无明显差别，研究结果提示复方鹿角颗粒制剂工艺稳定，该实验在为复方鹿角颗粒提供更好的质量控制同时，也为供试品的体内药代动力学研究提供了可靠的质量保障。　　3.复方鹿角颗粒的药代动力学研究。　　大鼠灌胃给予低、中、高三个不同剂量组复方鹿角颗粒，给药前及给药后不同时间点采集血样各250μL，样品经微固相萃取法处理后，应用LC-MS/MS法分析复方鹿角颗粒中香豆素、黄酮和萜类成分在大鼠体内的血药浓度。采用WinNonlin软件计算出Cmax、 AUC(0-t)和CLz/F等药代动力学参数。结果表明，检测方法经方法学验证，适合血浆中香豆素(补骨脂素、异补骨脂素)、黄酮（淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、宝藿苷I、淫羊藿次苷I、橙皮苷、柚皮苷）和萜类（马钱苷、红景天苷、酪醇）13种成分的同时测定;药-时曲线中淫羊藿苷、宝藿苷I、淫羊藿次苷I、柚皮苷、马钱苷各剂量组及朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C高剂量给药组出现双峰现象;复方鹿角颗粒在0.5～2.0 g·kg-1范围内给药，13种成分体内暴露量与给药剂量呈依赖关系。　　4.复方鹿角颗粒在大鼠体内的分布研究。　　取灌服复方鹿角颗粒后的大鼠体内7种脏器组织（心、肝、肺、肾、睾丸、脾、脑）制成匀浆液，经微固相萃取法处理后，LC-MS/MS法测定复方鹿角颗粒中药物成分在不同组织内的分布量，并将所得数据应用WinNonlin软件进行分析。研究结果表明，各有效组分在大鼠体内组织中的LC-MS/MS测定方法符合生物学样品测定要求，13种成分及代谢产物在心、肝、肺、肾、睾丸、脾、脑组织中均有分布，AUC(0-t)分析各成分在组织中的含量分布情况，14种成分的平均滞留时间为5～12 h左右，大鼠灌服复方鹿角颗粒后于6个不同时间点的7种组织样品中均有13种成分（补骨脂素、异补骨脂素、淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、宝藿苷I、淫羊藿次苷I、橙皮苷、柚皮苷、马钱苷、红景天苷、特女贞苷）及代谢产物酪醇得以检出，以肾、肝和心组织的检出量较高。实验中发现，药效成分同时在心和肾组织中具有较高的分布量，其中黄酮类成分在肾组织分布最高。结合中药性味归经和本方应用“补肾强心”法治疗慢性心力衰竭的中医理论，可知肾和心组织的靶向作用将有利于药效的发挥。　　5.复方鹿角颗粒在大鼠体内的排泄研究。　　大鼠灌服复方鹿角颗粒后收集其尿液、粪便和胆汁排泄物，样品稀释后经微固相萃取法处理，LC-MS/MS法测定复方鹿角颗粒中有效成分在大鼠体内排泄物中的排泄量，分别对其累积排泄量和排泄率进行计算。结合复方鹿角颗粒血药动力学对排泄情况进行分析，结果发现酪醇为红景天苷在体内代谢生成物，此外在血药浓度检测中发现淫羊藿中的黄酮成分含量较低，在体内吸收代谢较快并且可以发生相互转化。综合比较大鼠口服复方鹿角颗粒后香豆素、黄酮和萜类成分在体内的排泄情况发现，部分在体内吸收较差的成分的排泄量较大，并且各药物成分及其代谢产物均有一定的排泄，这可以在一定程度上防止药物在体内蓄积而产生毒性的现象发生。　　结论:　　本研究分别建立了准确、可靠的色谱-质谱联用技术，用于复方鹿角颗粒中18种氨基酸成分和13种香豆素、黄酮和萜类非氨基酸化学成分的含量测定。该方法可应用于复方鹿角颗粒动物给药后香豆素、黄酮和萜类等有效成分在体内的吸收、分布和排泄过程的研究。香豆素类成分吸收入血量较高，在肾和肝组织中的分布量较其他组织较多，且在尿液、粪便和胆汁中具有一定的排泄量。黄酮类化合物出现二次吸收，具有一定吸收入血量，在心、肾中均有较大的分布量，且尿液和胆汁中同时具有排泄量，表明该类化合物在体内经肝、肾代谢并且有肝肠循环现象，全方吸收较好，清除较为缓慢;萜类成分在血中亦出现二次吸收，但生物利用度不高，在肝、肾中分布量较高，经尿液、粪便和胆汁排泄量较大。总之，复方鹿角颗粒作为温补肾阳的慢性心力衰竭治疗药物，所含香豆素、黄酮和萜类成分为其发挥药效的部分物质基础;全方在促进吸收的同时并未显著抑制各组分的代谢排泄，体现了中药复方合理用药的原理。