【摘 要】
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肥胖症是指身体摄入的卡路里比消耗的卡路里多而导致脂肪异常积累的一种疾病。作为一种代谢类疾病,肥胖不仅会对视觉上的美观产生不良影响,还会对人类生命健康产生严重威胁。肥胖症标志物的含量是判断人是否肥胖的重要指标,建立新型、快速、灵敏的肥胖症标志物检测方法具有重要意义和临床应用价值。作为一种检测分析技术,电化学传感技术以其耗时短、特异性好、灵敏度优良等优势被广泛应用于食品卫生、临床医药和环境监测等多个领
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肥胖症是指身体摄入的卡路里比消耗的卡路里多而导致脂肪异常积累的一种疾病。作为一种代谢类疾病,肥胖不仅会对视觉上的美观产生不良影响,还会对人类生命健康产生严重威胁。肥胖症标志物的含量是判断人是否肥胖的重要指标,建立新型、快速、灵敏的肥胖症标志物检测方法具有重要意义和临床应用价值。作为一种检测分析技术,电化学传感技术以其耗时短、特异性好、灵敏度优良等优势被广泛应用于食品卫生、临床医药和环境监测等多个领域。该研究构建了两种电化学传感平台,通过选择导电性良好的纳米材料作为电化学传感器的基底材料,并使用特异性良好的连接材料完成对一个或多个肥胖症标志物的敏感分析。本论文主要内容如下:1.用于检测瘦素的高灵敏电化学传感平台的构建及应用瘦素(leptin,LEP)是一种由脂肪组织分泌的蛋白质类激素。为了实现其快速灵敏检测,该研究首先合成还原氧化石墨烯-金纳米材料(reduced graphene oxide-gold nanoparticle,rGO-Au)来修饰玻碳电极(glassy carbon electrode,GCE)提高其导电性能,同时采用生物纳米胶囊(biological nanocapsules-zz,ZZ-BNC)垂直定向固定瘦素抗体(leptin antibody,Anti-LEP),从而构建电化学传感器。所构建的传感器线性范围良好(0.001~1000 pg m L-1),检出限低(0.00087 pg m L-1)。该免疫传感器还可以用来检测由饮食诱发的肥胖小鼠模型中的瘦素,其结果与采用酶联免疫分析法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)的检测结果相一致。更重要的是,该传感器实现了不同身体质量指数(body mass index,BMI)的人体血清中瘦素的检测。2.电化学探针对瘦素和脂联素的同时检测本实验首先设计并制备羧化石墨烯-甲苯胺蓝(carboxyl functionalized graphene oxide-toluidine blue,CGO-TB)和羧化石墨烯-普鲁士蓝(carboxyl functionalized graphene oxide-prussian blue,CGO-PB)纳米复合材料分别作为瘦素和脂联素(adiponectin,ADP)的信号探针,用于二者的同时检测。CGO可以很好的吸附大量的TB和PB分子,这主要得益于CGO良好的导电性和较大的表面积,成功连接瘦素抗体和脂联素抗体(adiponectin antibody,Anti-ADP)后,即制得CGO-TB-Anti-LEP和CGO-PB-Anti-ADP信号探针。同时采用rGO-Au作为基底材料,蛋白A(protein A,Pro A)来固定抗体,提高了检测的灵敏度,在优化的条件下检测范围均为1~1000 pg m L-1,对瘦素的检测限为0.89 pg m L-1,对脂联素的检测限为0.68 pg m L-1。该传感器实现了对不同人体血清中瘦素和脂联素的同时检测,拓宽了传感器在代谢类疾病检测方面的应用。
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