IL-2与IL-7基因对犬细小病毒VP2 DNA疫苗的协同免疫增强作用

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:superzf
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
犬细小病毒病是危害我国养犬业最为严重的传染病之一。目前对该病尚无有效的治疗药物,主要通过接种弱毒疫苗进行预防。但接种弱毒疫苗后易出现亚临床感染或弱毒苗毒力返强等现象,近年来,DNA疫苗受到国内外学者的广泛关注,因为它既可以诱导体液免疫应答又可以诱导细胞免疫应答。然而DNA疫苗的免疫水平相对比较低,选择适当的DNA疫苗佐剂来加强DNA疫苗的免疫原性具有非常重要的意义。细胞因子表达载体作为DNA疫苗佐剂,因具有释放缓慢、作用时间持久和佐剂作用强等特点而被广泛应用。IL-2作为生物佐剂已被广泛应用于DNA疫苗和亚单位疫苗的研究。近年来,IL-7被认为是一种潜在的细胞因子生物佐剂,本实验室曾经用cIL-7作为CPV VP2的免疫佐剂免疫小鼠,证实cIL-7对免疫小鼠的体液免疫和细胞免疫都有明显的促进作用。为了解cIL-7与cIL-2在增强DNA疫苗免疫原性中是否有协同作用,本实验利用CPVVP2DNA疫苗对其进行了初步分析。本实验利用含内部核蛋白体进入位点(IRES)的真核表达载体构建cIL-2和cIL-7双基因表达载体。然后利用本实验室构建的CPV VP2、cIL-2和cIL-7表达载体及本实验构建的双基因表达载体,以不同组合对小鼠进行免疫,即VP2单免疫,VP2+cIL-2、VP2+cIL-7和VP2+cIL-2/cIL-7共免疫。通过ELISA方法检测免疫后不同时间小鼠血清VP2的抗体水平,并分析中和抗体的效价,通过细胞增殖实验检测免疫后小鼠脾脏淋巴细胞的增殖反应,并用ELISA方法测定小鼠淋巴细胞γ干扰素的表达水平。结果表明,本实验构建的双基因表达载体结构正确,并能够介导cIL-2与cIL-7基因在真核细胞中进行同步分泌表达。小鼠免疫结果表明,VP2+cIL-2/cIL-7共免疫组小鼠血清的抗体滴度和中和抗体效价均显著高于VP2+cIL-2和VP2+cIL-7共免疫组(P<0.05)。VP2+cIL-2/cIL-7共免疫组小鼠的淋巴细胞刺激指数比其它免疫组略有升高但尚未达到显著水平,然而γ干扰素的表达水平显著高于其它免疫组(P <0.05)。综上所述,cIL-2和cIL-7基因对CPV VP2DNA疫苗免疫原性的增强作用具有明显的协同效应。
其他文献
所谓的环境检测指的是基于环境检测技术,对检测点进行分布、采样和分析,并根据分析结果对目标点的环境污染状况进行评价的过程.而作为一种新事物,环境检测技术在我国发展较晚
家畜消化道线虫病是一类严重危害动物养殖业持续健康发展的寄生虫疾病,每年给我国畜牧业造成巨大的经济损失。目前,对家畜消化道线虫病的防治主要依靠化学驱虫药物,但长期使用易
在我国现代经济发展过程中,煤炭资源是现阶段不可或缺的重要资源,煤质检测在煤炭生产、加工、运销过程中都具有极其重要的意义,随着科学技术的进步煤质检测技术从检测方法、
公路隧道设计时,除了重视稳定性设计和结构强度,还应着力于细部和构造的设计.施工时不仅需要采用满足设计要求的施工工艺,还应在合理的工期内精细设计、施工.从设计因素和施
随着人们生活水平和生活质量的提高,单一的建筑物居住要求难以满足人们的正常需求,美观舒适的室内生活环境成为人们的追求.但是民用建筑中室内环境污染问题比较严重,并对人们