论文部分内容阅读
目的： 探讨上调子宫内膜癌中miRNA-199a-3p对阿霉素敏感性的影响及作用机制。 方法： 构建pSIREN-miRNA-199a-3p过表达质粒并稳定转染Ishikawa、SPEC-2细胞；应用逆转录PCR(RT-PCR)检测miRNA-199a-3p表达；噻唑蓝(MTT)、克隆形成实验检测细胞增殖；流式细胞术检测细胞凋亡；裸鼠荷瘤实验检测移植瘤的生长；免疫组化检测正常子宫内膜，不典型增生子宫内膜组织，子宫内膜癌组织中mTOR表达情况。western blot检测mTOR信号通路相关蛋白表达。 结果： 上调miRNA-199a-3p可显著抑制子宫内膜癌细胞Ishikawa、SPEC-2的克隆形成能力(P<0.01和P<0.05)；且miRNA-199a-3p可增强阿霉素对 Ishikawa、SPEC-2细胞的生长抑制(P<0.05和P<0.05)和凋亡诱导作用(P<0.01和P<0.01)；免疫组化证实mTOR在子宫不典型增生和子宫内膜癌组织中表达均阳性。western blot证实miRNA-199a-3p可显著下调mTOR及其效应蛋白P70S6K的磷酸化水平；体内实验证实miRNA-199a-3p明显抑制Ishikawa、SPEC-2移植瘤的生长(P<0.01和P<0.05)。 结论： miRNA-199a-3p可阻断mTOR信号通路,增强阿霉素对内膜癌的生长抑制和凋亡诱导作用。本研究为联合应用miRNA-199a-3p和阿霉素治疗子宫内膜癌提供了实验依据。