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目的：肺癌是目前世界上最常见的恶性肿瘤之一，其发病率高居恶性肿瘤之首，是病死率增长最快的恶性肿瘤。肺癌分为非小细胞肺癌（NSCLC）和小细胞肺癌(SCLC)两大类，其中，NSCLC约占肺癌总发病率的85%，多数患者发现时已达晚期，常合并恶性胸腔积液。传统的治疗手段如手术、放疗、化疗虽在不断的发展，但仍具有一定局限性，肺癌总体生存率仍无明显提高。随着对肿瘤发病机制的进一步研究及生物免疫技术的不断发展，生物治疗成为治疗恶性肿瘤的重要方法之一，其中作为机体最强大抗原递呈细胞和抗肿瘤免疫反应的启动者---树突状细胞（Dendritic cell，DC）备受关注。DC与细胞因子诱导的杀伤细胞（Cytokine-induced killer，CIK）共培养后获得的DC-CIK具有增值快、杀伤力强的特点，是肿瘤生物治疗研究的热点之一。本研究旨从非小细胞肺癌患者的恶性胸腔积液中获取成熟树突状细胞，探讨恶性胸腔积液来源的树突状细胞与细胞因子诱导的杀伤细胞共培养后对细胞因子诱导的杀伤细胞的作用及树突状细胞、细胞因子诱导的杀伤细胞两者共培养后联合奥沙利铂对GLC-82肺腺癌细胞的体外杀伤作用，为晚期肺癌患者提供治疗的新途径。方法：①收集2012年9月至2013年10月我院20例经手术、纤维支气管镜、淋巴结活检、经皮肺穿刺活检、痰检等方法确诊为非小细胞肺癌且合并胸腔积液患者的胸腔积液，每例收集800-1000ml。双层密度梯度离心法及细胞贴壁法获取恶性胸腔积液中DC前体细胞，加入粒-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、白介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)培养9天收获成熟DC；②分离健康人外周血单个核细胞（PBMC），加入干扰素-γ（IFN-γ）、CD3单克隆抗体（CD3Ab）、白介素-2（IL-2）体外诱导培养获取CIK细胞，将培养9天的部分CIK细胞与恶性胸腔积液来源的成熟DC以5:1比例混合继续培养5天获得树突状细胞调节的细胞因子诱导的杀伤细胞（DC-CIK细胞）；③流式细胞仪分别鉴定DC、CIK细胞及DC-CIK细胞的细胞表型；④MTT法检测奥沙利铂、DC-CIK细胞、CIK细胞单组或联合作用与GLC-82肺腺癌细胞后对GLC-82肺腺癌细胞的杀伤作用。结果：1.肺癌患者的恶性胸腔积液中可获取DC前体细胞，体外经GM-CSF、IL-4等细胞因子诱导培养9天后可获得成熟DC，经流式细胞仪检测培养9天的DC表面标志物与培养0天的DC表面标志物相比明显升高，分别为HLA-DR（70.97±8.96）%vs(41.36±8.57)%、CD80（56.61±7.01）%vs(14.38±5.16)%、CD83（58.85±7.05）%vs(18.49±9.43)%、CD86（60.27±13.94）%vs(20.39±6.67)%（P＜0.05）。2.人外周血来源的CIK细胞与恶性胸腔积液来源的DC联合培养获得DC-CIK细胞，流式细胞仪检测DC-CIK细胞的主要效应细胞CD3+/CD56+细胞（22.71±3.00）%与同期单独培养的CIK细胞的主要效应细胞CD3+/CD56+细胞（6.90±1.33）%相比明显增加（P＜0.05），MTT法检测DC-CIK细胞对GLC-82肺腺癌体外杀伤作用与CIK细胞亦明显增强（P＜0.05）。3．DC-CIK细胞联合奥沙利铂对GLC-82肺腺癌细胞的杀伤作用明显高于单独DC-CIK细胞治疗组及单独奥沙利铂治疗组，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:肺癌患者恶性胸腔积液中可获取DC的前体细胞，其在体外诱导培养可获得成熟DC，与人外周血来源的CIK细胞共培养后可促进CIK细胞的增殖、增强CIK细胞的杀伤毒性作用。恶性胸腔积液来源的DC与CIK细胞共培养获得的DC-CIK细胞联合奥沙利铂作用与GLC-82肺腺癌细胞在体外表现出明显的抑制作用，为肺癌患者的综合治疗提供了一定理论依据。