论文部分内容阅读
目的：研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)在临床不同类型恶性肿瘤组织中的表达,并初步探讨bFGF表达与恶性肿瘤细胞发生、生长、分化程度以及淋巴结转移、临床分期等因素相关性。通过了解恶性肿瘤组织bFGF表达,为bFGF单抗在临床恶性肿瘤分子靶向治疗中的临床试验提供依据。方法：1.制备腹水型bFGFmAb:复苏培养本室已建株分泌bFGFmAb的杂交瘤细胞。福氏不完全佐剂(IFA)免疫BALB/c小鼠,免疫后第7天,小鼠腹腔注射杂交瘤细胞2×106/只,7-12天腹水形成,抽取腹水。蛋白G亲和层析柱纯化bFGFmAb; BCA法测定bFGFmAb蛋白原液浓度；间接法ESLIA检测抗体效价,-20℃冻存备用。2.采用免疫组化SP法检测原发性非小细胞肺癌、乳腺癌、结肠癌以及黑色素瘤石蜡包埋组织131例中bFGF蛋白的表达。结果：1.制备腹水型bFGFmAb26.5ml,效价为1：1024000。纯化后bFGFmAb效价为1：4096000,SDS-PAGE电泳提示抗体纯度高,BCA法测定抗体浓度为8.586mg/ml,制备的抗体总量为89.148mg。2.bFGF单抗检测结果：1)非小细胞肺癌bFGF表达率(56.25%)、乳腺癌bFGF表达率(48.72%)、结肠癌bFGF表达率(53.66%)、黑色素瘤bFGF表达率(52.61%)。2)不同病理类型NSCLC中,腺癌的bFGF表达率为(56.25%),鳞癌的bFGF表达率为(64.26%),在不同分化程度NSCLC中,低分化癌bFGF表达率为(70%),中至高分化癌bFGF表达率为(33.33%),有显著差异。在不同分期NSCLC中,Ⅰ期bFGF表达率为(28.57%),Ⅱ期bFGF表达率为(44.44%)Ⅲ期、Ⅳ期bFGF表达率为(75%),有显著差异。3)bFGF阳性表达在乳腺癌有淋巴结转移为(61.53%),无淋巴结转移为(30.77%),两者之间比较差异有统计学意义(P=0.036)；bFGF阳性表达在Ⅰ期乳腺癌(20.07%),Ⅱ期(57.89%),Ⅲ～Ⅳ期(71.43%),三者之间比较差异有统计学意义(P=0.041)。4)bFGF阳性表达在结肠中高分化腺癌为(71.43%),在低分化腺癌为(35.00%),两者之间比较差异有统计学意义(P=0.032)；在Ⅰ期结肠癌bFGF阳性表达为(27.27%),Ⅱ期(28.57%),Ⅲ～Ⅳ期(73.91%),三者之间比较差异无统计学意义(P=0.013)。bFGF阳性表达无淋巴结转移为(27.78%),有淋巴结转移为(73.91%),两者之间比较差异有统计学意义(P=0.003)。5)bFGF阳性表达在Ⅰ期黑色素瘤为(25.00%),Ⅱ期(66.67%),Ⅲ～Ⅳ期(50.00%),三者之间比较差异有统计学意义(P=0.046)。bFGF阳性表达在黑色素瘤有淋巴结转移的为(72.73%),无淋巴结转移的为(25.00%),两者之间比较差异有统计学意义(P=0.040)。结论：1、bFGF在肺腺癌、鳞癌,乳腺癌,结肠癌,黑色素瘤恶性肿瘤细胞的胞质中高表达。2、bFGF在恶性肿瘤组织中的表达与恶性肿瘤细胞的分化程度、临床TNM分期及淋巴结转移情况相关。3、bFGF可成为恶性肿瘤诊断、区别肿瘤细胞恶性程度,预测恶性肿瘤转移的指标。