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目的:观察开腹手术和各种不同腹腔镜手术方法对大鼠系统免疫功能以及对腹腔局部和动脉血液pH值的影响,探讨腹腔镜手术与肿瘤生长和转移的关系,找出盆腹腔肿瘤尤其是恶性肿瘤适宜的腹腔镜手术方法。方法:将75只、体重250g左右、雌性S-D(Sprague-Dawley)大鼠随机分为5组:4组处理组分别为(1)开腹手术组、(2)CO2气腹腹腔镜手术组、(3)无气腹腔镜手术组、(4)N2气腹腹腔镜手术组和(5)对照组,每组15只。4组处理组分别模拟开腹和相应方法的腹腔镜手术过程,手术时间为1h。手术前后分别采取颈动脉血液行血气分析检测血液pH值变化并通过pH电极测量腹腔局部(腹膜表面)pH值变化情况,了解全身和局部酸碱环境的变化。分别于手术第0、1、3、7d经大鼠尾静脉取血,离心分离淋巴细胞,涂片后行免疫组织化学染色,高倍显微镜(400×)下行淋巴细胞计数,检测大鼠血液中CD3、CD4和CD8 T细胞的数值变化情况,了解不同手术处理后对大鼠系统免疫功能的影响。对照组无手术干预,仅行麻醉和颈动脉插管检测血液pH变化及尾静脉取血检测CD3、CD4和CD8 T细胞的数值,作为血液pH值和CD3、CD4和CD8 T细胞计数的正常对照参考值。结果:1、各组手术前后血液和腹腔pH值的变化:(1)手术前后各处理组组内血气分析pH值变化结果:开腹组(术前7.3889±0.0177,术后7.3852±0.0117,P>0.05),CO2气腹组(术前7.3877±0.0264,术后7.0918±0.0705,P<0.001),无气组(术前7.3889±0.0200,术后7.3891±0.0132,P>0.05),N2组(术前7.3886±0.0160,术后7.3804±0.0103,P>0.05),对照组(7.3880±0.0074)。术前各组组间血液pH值无差异(P>0.05);术毕时CO2气腹组pH值较术前明显降低(P<0.001),下降程度为各组中最大(P<0.01), N2组pH值亦有轻度降低,但与术前相应数值比较无统计学意义(P>0.05),开腹组和无气组的pH值与术前相比无明显变化(P>0.05)。手术结束时各组组间pH值比较,CO2气腹组明显低于其他各组(P<0.001),N2气腹组pH稍低于第1、3、5组,但并无统计学意义(P>0.05),第1、3组与对照组间比较无差异(P>0.05)。(2)手术前后各处理组腹腔局部pH值变化:开腹组(术前7.3849±0.0207,<WP=6>术后7.3831±0.0253,P>0.05),CO2气腹组(术前7.3867±0.0226,术后6.3740±0.1841,P<0.001),无气组(术前7.3840±0.0236,术后7.3820±0.0242,P>0.05),N2气腹组(术前7.3840±0.0210,术后7.3860±0.0168,P>0.05)。术前各组组间腹腔pH值无显著差异(P>0.05)。术后CO2气腹组腹腔pH值明显低于术前相应pH值,其下降程度明显大于其他各组(P<0.001),其余各组组间pH值变化程度比较无统计学意义(P>0.05);术毕时CO2气腹组腹腔pH值明显低于其他各组(P<0.001),而其余各组间腹腔pH值无统计学差异(P>0.05)。 2、各组CD3、CD4和CD8细胞数值变化:(1)手术结束时(第0d)各组CD3、CD4、CD8细胞计数无统计学差异,即术毕时各种手术方法对免疫功能抑制程度无差异(P>0.05)。(2)术后第1d 第1-4组CD3、CD4和CD8计数均明显低于各组术前相应的计数值和对照组正常计数值(P<0.001),其中开腹组CD3、CD4和CD8细胞计数值明显低于其他4组(P<0.001),下降程度明显大于其他4组下降程度(P<0.001),说明开腹手术后对机体系统免疫功能的抑制程度最大;腹腔镜手术组中,CO2气腹组CD3、CD4和CD8细胞数值下降程度大于无气和N2组(P<0.001),后两组间无统计学差异(>0.05),即CO2气腹腹腔镜手术后对机体的系统免疫功能抑制程度大于无气和N2组的影响。(3)术后第3d各处理组CD3、CD4和CD8细胞计数均有所回升,无气和N2组CD3、CD4和CD8细胞计数值基本相同(P>0.05)且高于其他各组(P<0.01),说明此两组术后恢复最快且恢复程度基本相同;开腹组CD3、CD4和CD8细胞计数值上升幅度最小,术后恢复最慢(P<0.01);CO2气腹组CD3、CD4和CD8细胞计数介于开腹组(P<0.01)与无气和N2组之间(P<0.01),其术后系统免疫功能的恢复介于此三组之间。(4)术后第7d各组CD3、CD4和CD8细胞计数均恢复术前正常水平(P>0.05),各组间亦无明显差异(P>0.05),系统免疫功能基本恢复正常。结论:1、与腹腔镜手术比较,开腹手术对机体术后系统免疫功能抑制程度较大,而且手术后早期恢复较慢。CO2气腹腹腔镜手术对系统免疫功能抑制程度小于开腹组,但稍大于无气或N2腹腔镜手术组,而且术后恢复晚于无气组和N2组。无气组和N2组腹腔镜手术后对系统免疫功能的抑制程度基本相同,两组无统计学差异。2、开腹手术、无气腹腔镜手术或N2气腹腹腔镜手术对血液<WP=7>和腹腔pH值无显著影响,而CO2气腹可导致血液和腹腔局部pH值均有明显降低,其中腹腔pH值下降尤为显著,对腹腔局部酸碱平衡的稳定影响较大。3、CO2气腹介质的特殊气体理化性质可导致全身尤其是腹腔局部酸碱环境的显著改变,可能使腹膜局部免疫功能紊乱,从而导致促进术后肿瘤生长加快和腹腔内及穿刺口肿瘤种植转移率升高的重要因素之一;有关腹膜局部免疫功能的变化和引起这一变化的各种因素,以及腹膜免疫功能改变与腹腔镜手?