不同剂量维生素A和D3对大鼠免疫细胞活性影响的研究

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目的雒生素A和维生素D作为人体重要的微量营养素与人体的健康息息相关。维生素A除了可以锥持正常视觉,还可以调节体内细胞免疫、体液免疫过程,并可应用于某些疾病的预防和治疗。而维生素D不仅对体内钙磷起重要调节作用,同时对人体免疫功能也起重要的调节作用。本实验旨在通过对大鼠补充不同剂量的维生素A和维生素D3,观察两种维生素在不同剂量下对大鼠免疫细胞活性的影响。方法取50只初断乳Wistar大鼠,雌雄各半,随机分为五组,分别为对照组、VA组(5倍生理剂量)、10倍VD3组(10倍生理剂量)、VA+VD3组(5倍生理剂量VA和10倍生理剂量VD3)和50倍¥03组(50倍生理剂量),均给予基础词料(按AIN-93G配方)。对照组大鼠按大鼠体重用大豆色拉油(1ml/kg)灌胃,摄入维生素A (VA)和维生素D3(VD3)均为大鼠生理需要量(VA量为278IU/kg. d,乂仏量为20IU/kg. d,按照人与大鼠剂量换算系数6.25计算);维生素补充组分别用大豆色拉油将VA、 VD3稀释成不同浓度油剂后按大鼠体重1ml/kg给予灌胃:VA组为VA1390IU/kg. d;10倍VD3组为VD3200IU/kg. d; VA+VD3组为VA1390IU/kg. d+VD3200IU/kg. d;50倍VD3组为VD31000IU/kg.d,持续灌胃4周。实验结束时麻醉无痛处死大鼠,取大鼠血样(约5ml)离心-,采用CCK8(cell counting kit-8)法检测淋巴细胞增殖活性和CD-14标记的单核细胞吞噬FITC-葡聚糖后用流式细胞术检测单核细胞吞噬功能。结果1.用2X2析因设计分析VA和VD3的交互作用:经过4周维生素补充后,对对照组、VA组、10倍VD3组、VA+VD3组采用2X2析因分析,结果显示10倍VD3组大鼠淋巴细胞#殖活性明显增强,其0D值较对照组高0.41(F=6.72, q=6.04, p<0.05);但VA组0D值与对照组比较无显著性差异(p〉0.05);而经交互作用分析VA和VD3之间无明显协同作用。采用PE-anti-CD14标记的单核细胞吞噬FITC-葡聚糖后分析其吞?活性(用荧光强度表示),结果显示VA组、10倍VD3组和VA+¥&3组的荧光强度值与对照缉比较,均值分别高3.65、4.91和4.50,显示与对照组比较,各组单核细胞吞噬功能均明显增强(P均〈0.05),而其他各组间均没有显著性差异(p均〉0.05),析擢分析发现在单核细胞吞噬功能方面VA和VD3之间无交互作用。2.补充不同浓度的¥仏对大鼠免疫纲胞活性的影响:经过4周¥03补充后,观察比较对照组、10倍VD:i组和50倍VD3组的大鼠淋1:’,细胞增:始活性和单核细胞吞墘活性的改变。4周后10倍VD3组淋巴细胞增殖、M性的0D值比对照组高0.41,差异有统计学意义(P<0.05),但50倍VD3组与对照组扣It,其淋巴细胞增殖活性无显^性差异(p>0.05)。采用流式细胞术检测大鼠单核细胞吞噬功能,结果显示10倍VD:,组大鼠单核细胞吞噬活性的荧光强度值为19.98,明显高亍对照组的15.48,而50倍VD3组大鼠单核细胞吞噬活性的荧光强度值与对照组比较,无显著性差异。结论补充5倍生理剂量的VA或(和)10倍生理剂量的VD3均可有效地改善大鼠淋巴细胞增殖活性和单核细胞吞噬活性,而未见两者联合补充的交互作用,较高剂量的VD:i (50倍生理剂量)补充对大鼠淋巴细胞增殖活性和单核细胞吞噬功能均未见明显改善,具体机制尚需深入研究。
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