碗莲茎尖组织培养技术的初步研究

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本研究以碗莲茎尖为外植体,探讨了不同生长调节物质在茎尖的诱导、增殖以及诱导生根过程中的作用,分析不同培养过程中主要影响因子及其有效浓度范围;同时以碗莲幼嫩叶片、藕节、叶柄基部为外植体,探讨其愈伤组织的诱导,意为碗莲的快速繁殖提供参考。实验结果如下:1)采用0.10%升汞和75%酒精为消毒剂对外植体进行处理时,茎尖的适宜消毒时间在10 min左右。2)最佳取材时间为10月份至12月份。3)碗莲启动培养的适宜培养基为:1.00 mg·L-1 6-BA +0.25 mg·L-1NAA +1.00 mg·L-1 GA3,启动率可达87.5%,主要影响因素是赤霉素NAA和GA3。4)固液培养状态:上层为5ml厚的MS + 1.0 mg·L-1 6-BA + 0.25 mg·L-1 NAA + 1.0 mg·L-1 GA3液态培养基,下层为1cm厚的MS + 1.0 mg·L-1 6-BA +0.25 mg·L-1 NAA + 1.0 mg·L-1 GA3固态培养基,更有利于芽诱导。5)适宜的增殖培养基为MS+2.0 mg·L-16-BA+ 0.25 mg·L-1 NAA。增殖系数最高为3.3,且芽苗叶柄较长,叶色浓绿,叶片伸展较多。6)四种碳源对增殖影响的大小排序为:葡萄糖>蔗糖>果糖>麦芽糖。葡萄糖效果最好。7)碗莲的继代时间以40 d为宜。8)生根的适宜培养基为:MS+1.00 m g·L-1 IBA,平均根数为11.68个,平均根长为42.00mm.。9) 4月初进行炼苗移栽,成活率可达100%。10)培养过程中污染的芽苗用75%酒精1min、0.1%HgCl2 10min灭菌效果最好。11)本试验用叶片柄基部、藕节做外植体进行诱导愈伤组织,但均未成功。
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